Question

【題目】電影《我不是藥神》引起人們對(duì)慢性粒細(xì)胞白血病（CML）的關(guān)注，CML患者的造血干細(xì)胞中22號(hào)染色體上的bcr基因與來(lái)自9號(hào)染色體上的基因abl形成bcr/abl融合基因，該融合基因的表達(dá)產(chǎn)物能促進(jìn)骨髓細(xì)胞內(nèi)mTOR蛋白過(guò)度表達(dá)從而引起白血病。抗mTOR單克隆抗體可抑制mTOR蛋白的作用而治療CML�；卮鹣铝袉�(wèn)題：

（1）科學(xué)家用___________對(duì)小鼠進(jìn)行注射，一段時(shí)間后從小鼠脾臟提取出B淋巴細(xì)胞；他們通過(guò)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)小鼠骨髓瘤細(xì)胞，培養(yǎng)過(guò)程中需要定期更換培養(yǎng)液，原因是___________。

（2）使用___________（生物的方法）將骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，置于選擇培養(yǎng)基中篩選出雜交瘤細(xì)胞，并經(jīng)過(guò)___________培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，多次篩選后獲得的細(xì)胞具有的特點(diǎn)是 ___________，將這些細(xì)胞注入小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)，在___________中可提取得到抗mTOR單克隆抗體。

（3）抗mTOR單克隆抗體在治療CML上，具有的特點(diǎn)是_______________________。

Answer 1

【答案】mTOR（蛋白） 防止代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害 滅活的（仙臺(tái)）病毒 克隆化 能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生單一性抗體 腹水 特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可大量制備

【解析】

1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的流程：取動(dòng)物組織塊→剪碎組織→用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中(原代培養(yǎng))→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞用酶分散為單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液(傳代培養(yǎng))→放入二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

2.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要滿足以下條件：①無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境;②營(yíng)養(yǎng)；③溫度和pH ；④氣體環(huán)境：95%空氣+5%CO2。

3.單克隆抗體的制備流程：人工誘導(dǎo)經(jīng)過(guò)免疫的B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，再經(jīng)篩選獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，最終通過(guò)培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞獲得單克隆抗體。

（1）根據(jù)題意分析，該題是制備抗mTOR單克隆抗體，因此應(yīng)該將mTOR（蛋白）作為抗原注射到小鼠體內(nèi)，一段時(shí)間后從小鼠脾臟提取出相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞；動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中需要不斷的更新培養(yǎng)液，是為了防止代謝產(chǎn)物積累對(duì)細(xì)胞自身造成危害。

（2）可使用滅活的仙臺(tái)病毒誘導(dǎo)骨髓瘤細(xì)胞和經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞融合；選擇培養(yǎng)基篩選出的雜交瘤細(xì)胞需要經(jīng)過(guò)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)，經(jīng)過(guò)多次篩選后符合要求的雜交瘤細(xì)胞能迅速大量繁殖，又能產(chǎn)生單一性抗體；將篩選到的雜交瘤細(xì)胞注入小鼠腹腔內(nèi)培養(yǎng)，在腹水中可提取得到抗mTOR單克隆抗體。

（3）抗mTOR單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可大量制備的優(yōu)點(diǎn)。