Question

我國(guó)科研人員發(fā)現(xiàn)，彎曲的蠶絲由于彎折處易斷裂，其強(qiáng)度低于由蜘蛛紡績(jī)器拖牽絲的直絲，并首次在世界上通過(guò)了用轉(zhuǎn)基因方法將“綠色熒光蛋白基因”與“蜘蛛拖牽絲基因”拼接后成功插入蠶絲基因組中，并在受體細(xì)胞巾得到成功表達(dá)。

（1）在這項(xiàng)“基因工程”的操作中，目的基因是____，
采用綠色熒光蛋白基因的主要目的是____。

（2）曲基因組合在導(dǎo)入受體細(xì)胞前必須進(jìn)行的步驟是：將其與由細(xì)菌體內(nèi)取得的____進(jìn)行切割處理，以保證有相同的____，并拼接成____。如果引入的受體細(xì)胞是細(xì)菌，還要對(duì)細(xì)菌作____處理。

Answer 1

（1）拖牽絲基因 作為標(biāo)記(基因)

（2）質(zhì)粒 黏性末端 重組質(zhì)粒(或重組DNA) CaCl₂(或提高膜的通透性)

從題目提供的信息不難看出，蜘蛛紡績(jī)器拖牽絲的直絲強(qiáng)度比蠶絲要大，所以拖牽絲基因是目的基因。綠色熒光蛋白基因是作為標(biāo)記基因。在形成重組DNA時(shí)，首先用同一種限制性內(nèi)切酶切割目的基因和質(zhì)粒，得到相同的黏性末端，再用DNA連接酶形成重組質(zhì)粒，如果重組質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌體內(nèi)，必須對(duì)細(xì)菌細(xì)胞壁用氯化鈣處理，增加其通透性，便于重組質(zhì)粒進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)。