某質(zhì)粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamH I三種限制酶切割位點,同時還含有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因。利用此質(zhì)粒獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的過程如圖所示,請回答下列問題。
(1)將含有目的基因的DNA與質(zhì)粒分別用Sal I酶切,酶切產(chǎn)物用______________催化連接,兩個DNA片段的連接結(jié)果有 種。
(2)將轉(zhuǎn)入抗鹽基因的煙草細(xì)胞培育成完整的植株需要用_____________________技術(shù),愈傷組織經(jīng) 進而形成完整植株,此過程除營養(yǎng)物質(zhì)外還必須向培養(yǎng)基中添加 。
(1)DNA連接酶 3
(2)植物組織培養(yǎng) 再分化 植物激素(細(xì)胞分裂素或生長素)
【解析】
試題分析:(1)將DNA片段連接起來用的是DNA連接酶,兩個DNA片段的連接存在質(zhì)粒與質(zhì)粒連接、質(zhì)粒與目的基因連接、目的基因與目的基因連接3種連接方式。
(2)要將單個的細(xì)胞培育成完整的植株需要利用植物組織培養(yǎng)技術(shù),愈傷組織通過細(xì)胞分化和細(xì)胞增殖發(fā)育成完整植株。在植物組織培養(yǎng)過程中植物激素(生長素和細(xì)胞分裂素)起著關(guān)鍵性的作用,當(dāng)生長素與細(xì)胞分裂素含量相當(dāng)時,有利于脫分化,當(dāng)生長素大于細(xì)胞分裂素時,有利于生根,當(dāng)生長素含量小于細(xì)胞分裂素時,有利于生芽。
考點:本題考查基因工程操作步驟
點評:本題難度中等,屬于考綱理解層次。解答本題的關(guān)鍵是理解基因工程的操作步驟以及植物組織培養(yǎng)的過程——脫分化和再分化。
科目:高中生物 來源: 題型:
某質(zhì)粒上有Sal I、HindIII、BamH I三種限制酶切割位點,同時還含有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因。利用此質(zhì)粒獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的過程如圖所示,請回答下列問題.
(1)將含有目的基因的DNA與質(zhì)粒分別用Sal I酶切,酶切產(chǎn)物用 催化連接后,兩個DNA片段的連接結(jié)果有 種。
(2)在構(gòu)建重組質(zhì)粒時,應(yīng)選用 兩種酶對 進行切割,
以保證重組DNA序列的唯一性。
(3)為篩選出導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌,應(yīng)在培養(yǎng)基中加入 ,理由是 。
(4)將轉(zhuǎn)人抗鹽基因的煙草細(xì)胞培育成完整的植株需要用 技術(shù),愈
傷組織經(jīng) 進而形成完整植株,此過程除營養(yǎng)物質(zhì)外還必須向培
養(yǎng)基中添加 。
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科目:高中生物 來源: 題型:
某質(zhì)粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamH I三種限制酶切割位點,同時還含有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因。利用此質(zhì)粒獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的過程如圖所示,請回答下列問題。
(1)將含有目的基因的DNA與質(zhì)粒分別用Sal I酶切,酶切產(chǎn)物用_____________催化連接后,兩個DNA片段的連接結(jié)果有 種。
(2)在構(gòu)建重組質(zhì)粒時,應(yīng)選用 酶和 ______ 酶對 進行切割,以保證重組DNA序列的唯一性。
(3)為篩選出導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌,應(yīng)在培養(yǎng)基中加入________________,理由是 。
(4)將轉(zhuǎn)入抗鹽基因的煙草細(xì)胞培育成完整的植株需要用__________________技術(shù),愈傷組織經(jīng) 進而形成完整植株,此過程除營養(yǎng)物質(zhì)外還必須向培養(yǎng)基中添加 。
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科目:高中生物 來源:2013屆北京市門頭溝育園中學(xué)高三階段考試(二)生物試卷(帶解析) 題型:綜合題
某質(zhì)粒上有SalⅠ、HindⅢ、BamH I三種限制酶切割位點,同時還含有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因。利用此質(zhì)粒獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的過程如圖所示,請回答下列問題。
(1)將含有目的基因的DNA與質(zhì)粒分別用Sal I酶切,酶切產(chǎn)物用______________催化連接,兩個DNA片段的連接結(jié)果有 種。
(2)將轉(zhuǎn)入抗鹽基因的煙草細(xì)胞培育成完整的植株需要用_____________________技術(shù),愈傷組織經(jīng) 進而形成完整植株,此過程除營養(yǎng)物質(zhì)外還必須向培養(yǎng)基中添加 。
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科目:高中生物 來源: 題型:
36.【生物-選修3】(15分)某質(zhì)粒上有Sal I、Hind III、BamH I三種限制酶切割位點,同時還含有抗四環(huán)素基因和抗氨芐青霉素基因。利用此質(zhì)粒獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草的過程如圖所示,請回答下列問題:
(1)從基因文庫中獲得的抗鹽基因可用___________技術(shù)進行擴增。將抗鹽基因?qū)霟煵菁?xì)胞內(nèi),使煙草植株產(chǎn)生抗鹽性狀,這種新性狀的產(chǎn)生所依據(jù)的原理是___________。
(2)如果將抗鹽基因直接導(dǎo)入煙草細(xì)胞,一般情況下,煙草不會具有抗鹽特性,原因是抗鹽基因在煙草細(xì)胞中不能___________,也不能___________。
(3)在構(gòu)建重組質(zhì)粒時,應(yīng)選用___________兩種酶對___________進行切割,以保證重組DNA序列的唯一性。
(4)為了確定抗鹽煙草是否培育成功,既要用放射性同位素標(biāo)記的___________
作探針進行分子雜交檢測,又要用___________方法從個體水平鑒定煙草植株的耐鹽性。
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