組建理想的載體需要對(duì)天然的質(zhì)粒進(jìn)行改造�？茖W(xué)家在體外構(gòu)建的大腸桿菌的一種質(zhì)粒只有某限制酶的一個(gè)識(shí)別序列，位于該質(zhì)粒的lacZ基因中。lacZ基因若無(wú)外源基因插入，便可表達(dá)出半乳糖苷酶。當(dāng)培養(yǎng)基中含有兩種物質(zhì)I和X時(shí)，X便會(huì)被半乳糖苷酶水解成藍(lán)色，大腸桿菌將形成藍(lán)色菌落。如果lacZ基因中插入了外源基因，帶有該種質(zhì)粒的大腸桿菌便不能表達(dá)半乳糖苷酶，培養(yǎng)基中的X不會(huì)被水解成藍(lán)色，大腸桿菌將形成白色菌落。體外構(gòu)建的這種大腸桿菌質(zhì)粒還攜帶了氨芐青霉素抗性基因。下圖是利用lacZ基因的插入失活、篩選出重組質(zhì)粒的示意圖。據(jù)圖回答下列問(wèn)題：

（1）作為受體，大腸桿菌應(yīng)________（填“含有”或“不含”）氨芐青霉素抗性基因，以方便篩選已導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體大腸桿菌。取用氯化鈣溶液處理過(guò)的受體大腸桿菌，置于試管Ⅱ中，完成基因工程操作的________步驟。

（2）圖中的選擇培養(yǎng)基中除含有大腸桿菌必需的葡萄糖、氮源、無(wú)機(jī)鹽、水、生長(zhǎng)因子等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還應(yīng)加入________等物質(zhì)，用以篩選導(dǎo)入了重組質(zhì)粒的受體大腸桿菌。

（3）將上述處理后的大腸桿菌置于圖中選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)，以檢測(cè)受體大腸桿菌是否導(dǎo)入重組質(zhì)粒，請(qǐng)預(yù)測(cè)菌落的顏色，并分析結(jié)果：

①________。

②________。

（4）若改用噬菌體為運(yùn)載體，科學(xué)家分別用32P、35S標(biāo)記噬菌體內(nèi)的目的基因、蛋白質(zhì)外殼，在下圖中標(biāo)記元素32P、35S所在部位依次是________（填圖中標(biāo)號(hào)）。

答案：
解析：

　�。�1）不含　目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞；

　　（2）I、X、氨芐青霉素；

　�。�3）①如果長(zhǎng)出藍(lán)色菌落，說(shuō)明沒(méi)有與目的基因重組的質(zhì)粒已轉(zhuǎn)入受體菌（或說(shuō)明重組質(zhì)粒沒(méi)導(dǎo)入受體大腸桿菌）

　�、谌绻L(zhǎng)出白色菌落，說(shuō)明重組質(zhì)粒已導(dǎo)入受體大腸桿菌；

　�。�4）①、④


練習(xí)冊(cè)系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

質(zhì)粒能成功轉(zhuǎn)入植韌細(xì)胞，并將質(zhì)粒上的一部分外源DNA整合到植物的DNA中。  下圖表示利用質(zhì)粒進(jìn)行轉(zhuǎn)化獲得抗除草劑大豆的過(guò)程。請(qǐng)據(jù)圖分析回答：

（1）④過(guò)程應(yīng)用的主要生物技術(shù)是        ，該技術(shù)的理論依據(jù)是        。關(guān)鍵步驟是利用含有一定營(yíng)養(yǎng)和激素的培養(yǎng)基誘導(dǎo)植物細(xì)胞進(jìn)行________和_________。

（2）過(guò)程②需要通過(guò)        使質(zhì)粒與目的基因切口黏合。

（3）組建理想的載體需要對(duì)天然的質(zhì)粒進(jìn)行改造。下圖是天然土壤農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖（示部分基因及部分限制性?xún)?nèi)切酶作用位點(diǎn)），據(jù)圖分析：

若用限制酶I分別切割改造過(guò)的理想質(zhì)粒和帶有抗除草劑基因的DNA分子，并構(gòu)成重組Ti質(zhì)粒。分別以含四環(huán)素和卡那霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)已成功導(dǎo)入抗蟲(chóng)基因的水稻胚細(xì)胞，觀察到的細(xì)胞生長(zhǎng)的現(xiàn)象是                                        _____________________________________________。

（4）若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的粘性末端為序列，則該酶識(shí)別的核苷酸序列是                   

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科目：高中生物 來(lái)源：2012屆江蘇省鹽城中學(xué)高三上學(xué)期期中考試生物試卷 題型：綜合題

2009年10月，我國(guó)自主研發(fā)的轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)水稻“華恢1號(hào)”獲得農(nóng)業(yè)部頒發(fā)的安全證書(shū)。下圖表示該抗蟲(chóng)水稻主要培育流程，據(jù)圖回答：

（1）④過(guò)程應(yīng)用的主要生物技術(shù)是              。
（2）殺蟲(chóng)基因（crylA）是人們根據(jù)幾種Bt毒蛋白的分子結(jié)構(gòu)，設(shè)計(jì)并人工合成的，這屬于    工程技術(shù)范疇。
（3）組建理想的載體需要對(duì)天然的質(zhì)粒進(jìn)行改造。下圖是天然土壤農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖（示部分基因及部分限制性?xún)?nèi)切酶作用位點(diǎn)），據(jù)圖分析：

①人工改造時(shí)，要使抗蟲(chóng)基因表達(dá)，還應(yīng)插入____________。
②人工改造時(shí)用限制酶Ⅱ處理，其目的是：第一，去除質(zhì)粒上的                   （基因），保證T-DNA進(jìn)入水稻細(xì)胞后不會(huì)引起細(xì)胞的無(wú)限分裂和生長(zhǎng)；第二，使質(zhì)粒帶有單一限制酶作用位點(diǎn)，有利于___________          。第三，使質(zhì)粒大小合適，可以提高轉(zhuǎn)化效率等。
③若用限制酶Ⅰ分別切割改造過(guò)的理想質(zhì)粒和帶有抗蟲(chóng)基因的DNA分子，并構(gòu)成重組Ti質(zhì)粒。分別以含四環(huán)素和卡那霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)已成功導(dǎo)入抗蟲(chóng)基因的水稻胚細(xì)胞，觀察到的細(xì)胞生長(zhǎng)的現(xiàn)象是                                            。
（4）若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的粘性末端為，則該酶識(shí)別的核苷酸序列是             。

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科目：高中生物 來(lái)源：2011屆湖南省長(zhǎng)沙市一中學(xué)高三第六次月考生物試卷 題型：綜合題

下圖表示“華恢1號(hào)”抗蟲(chóng)水稻主要培育流程，據(jù)圖回答：

(1)殺蟲(chóng)基因通過(guò)①～④，最終在宿主細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程叫做　　　　。
(2)殺蟲(chóng)基因(crylA)是根據(jù)幾種Bt毒蛋白的分子結(jié)構(gòu)，設(shè)計(jì)并人工合成的，這屬于　　　　工程技術(shù)范疇。
(3)組建理想的載體需要對(duì)天然的質(zhì)粒進(jìn)行改造。下圖是天然土壤農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖(示部分基因及部分限制酶作用位點(diǎn))，據(jù)圖分析：

�、偃斯じ脑熨|(zhì)粒時(shí)，要使抗蟲(chóng)基因能成功表達(dá)，還應(yīng)插入　　　　。
②人工改造質(zhì)粒時(shí)，用限制酶Ⅰ處理，其目的是：第一，去除質(zhì)粒上的　　　　　　　　(基因)，保證T－DNA進(jìn)入水稻細(xì)胞后不會(huì)促進(jìn)細(xì)胞的分裂和生長(zhǎng)；第二，使質(zhì)粒帶有單一限制酶作用位點(diǎn)，有利于　　　　　　　　　　　　　　　。第三，使質(zhì)粒大小合適，可以提高轉(zhuǎn)化效率等。
③若用限制酶Ⅱ分別切割經(jīng)過(guò)②過(guò)程改造的理想質(zhì)粒和帶有抗蟲(chóng)基因的DNA分子，并構(gòu)成重組Ti質(zhì)粒。分別以含四環(huán)素和卡那霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)已成功導(dǎo)入抗蟲(chóng)基因的水稻胚細(xì)胞，觀察到的細(xì)胞生長(zhǎng)的情況是　　　　　　　　　　　　　。
(4)若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的黏性末端為，則該酶識(shí)別的核苷酸序列是　　　　　　　　　。

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科目：高中生物 來(lái)源：2015屆河北衡水中學(xué)高二上期第五次調(diào)研考試生物卷（解析版） 題型：綜合題

（11分）2009年10月，我國(guó)自主研發(fā)的轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)水稻“華恢1號(hào)”獲得農(nóng)業(yè)部頒發(fā)的安全證書(shū)。下圖表示該抗蟲(chóng)水稻主要培育流程，據(jù)圖回答：

（1）殺蟲(chóng)基因（crylA）是人們根據(jù)幾種Bt毒蛋白的分子結(jié)構(gòu)，設(shè)計(jì)并人工合成的，這屬于                工程技術(shù)范疇。除了上述方法，有些目的基因可以從基因文庫(kù)中獲取�；蛭膸�(kù)包含                  和                  等類(lèi)型，其中前者的基因中含有啟動(dòng)子。

（2）圖中③過(guò)程中，能促進(jìn)農(nóng)桿菌移向植物細(xì)胞的物質(zhì)是           類(lèi)化合物。Ti質(zhì)粒是農(nóng)桿菌中的一種質(zhì)粒，其上有T－DNA，把目的基因插入Ti質(zhì)粒的T－DNA中是利用T－DNA                                             的特點(diǎn)。

（3）植物基因工程中將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞的方法除了農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法之外，還可采取的方法是                             （任舉一例）。

（4）對(duì)目的基因轉(zhuǎn)錄和翻譯產(chǎn)物的檢測(cè)分別采用                 、                技術(shù)。

（5）組建理想的載體需要對(duì)天然的質(zhì)粒進(jìn)行改造。下圖是天然土壤農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖（示部分基因及部分限制酶作用位點(diǎn)），據(jù)圖分析：

①人工改造時(shí)，要使抗蟲(chóng)基因表達(dá)，在上圖所示基因表達(dá)載體中還應(yīng)添加               。

②人工改造時(shí)用限制酶Ⅱ處理，其目的之一是除去或破壞質(zhì)粒上的               （填相應(yīng)基因的簡(jiǎn)寫(xiě)字母），保證T-DNA進(jìn)入水稻細(xì)胞后不會(huì)引起細(xì)胞的無(wú)限分裂和生長(zhǎng)。若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的黏性末端為，則該酶識(shí)別的核苷酸序列是                 。

 

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科目：高中生物 來(lái)源：2013屆天津市高二上學(xué)期期末考試生物（理）試卷 題型：綜合題

2009年10月，我國(guó)自主研發(fā)的轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)水稻“華恢l號(hào)”獲得農(nóng)業(yè)部頒發(fā)的安全證書(shū)。下圖表示該抗蟲(chóng)水稻主要培育流程，據(jù)圖回答：

(1)①過(guò)程需要           和        酶。

(2)組建理想的載體需要對(duì)天然的質(zhì)粒進(jìn)行改造。下圖是天然土壤農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒結(jié)構(gòu)示意圖(示部分基因及部分限制性?xún)?nèi)切酶作用位點(diǎn))，據(jù)圖分析：

①人工改造時(shí)，要使抗蟲(chóng)基因表達(dá)，還應(yīng)插入         。

②人工改造時(shí)用限制酶Ⅱ處理，其目的是：第一，去除質(zhì)粒上的      基因，保證T-DNA進(jìn)入水稻細(xì)胞后不會(huì)引起細(xì)胞的無(wú)限分裂和生長(zhǎng)；第二，使質(zhì)粒帶有單一限制酶作用位點(diǎn)，有利于               。第三，使質(zhì)粒大小合適，可以提高轉(zhuǎn)化效率等。

③若用限制酶Ⅰ分別切割改造過(guò)的理想質(zhì)粒和帶有抗蟲(chóng)基因的DNA分子，并構(gòu)成重組Ti質(zhì)粒。分別以含四環(huán)素和卡那霉素的培養(yǎng)基培養(yǎng)已成功導(dǎo)入抗蟲(chóng)基因的水稻胚細(xì)胞，觀察到的細(xì)胞生長(zhǎng)的現(xiàn)象是                                   。

(3)若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的粘性末端為 則該酶識(shí)別的核苷酸序列

是               。

 

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