Question

【題目】埃博拉病毒是一種能導(dǎo)致人類及脊椎動(dòng)物出血熱的致死性病毒，有很高的致死率。埃博拉病毒的NP蛋白在病毒復(fù)制中具有重要作用，也是診斷該病重要的靶蛋白。下圖是某科研機(jī)構(gòu)研制抗NP蛋白單克隆抗體的流程圖�；卮鹣铝袉栴}：

(1)①過程需要_________酶催化。在體外擴(kuò)增大量NP蛋白基因需要采用____________(填中文名稱)反應(yīng)，該反應(yīng)的實(shí)質(zhì)是____________。

(2)在NP蛋白基因表達(dá)載體上NP蛋白基因的首尾兩端分別為___________、___________。

(3)過程③獲得的雜交瘤細(xì)胞能無限增殖，是由于該細(xì)胞中含有來自于__________細(xì)胞的遺傳物質(zhì)。獲得單克隆抗體需要經(jīng)過兩次篩選，其中第二次篩選的目的是____________。

Answer 1

【答案】反(逆)轉(zhuǎn)錄 聚合酶鏈?zhǔn)?/span> DNA復(fù)制 啟動(dòng)子 終止子 小鼠骨髓瘤 獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞

【解析】

①逆轉(zhuǎn)錄、②構(gòu)建基因表達(dá)載體、③細(xì)胞融合。

（1）①逆轉(zhuǎn)錄需要逆轉(zhuǎn)錄酶的催化。體外擴(kuò)增目的基因常用PCR技術(shù)，全稱是多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，其原理是DNA的復(fù)制。

（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，需要把目的基因插入到啟動(dòng)子和終止子之間，啟動(dòng)子是RNA聚合酶結(jié)合的位點(diǎn)，啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄。

（3）經(jīng)過③細(xì)胞融合可以獲得雜交瘤細(xì)胞，因?yàn)殡s交瘤細(xì)胞含有小鼠的骨髓瘤細(xì)胞，骨髓瘤細(xì)胞可以無限增殖，故雜交瘤細(xì)胞也可以無限增殖。單克隆抗體制備的過程中需要經(jīng)過兩次篩選，第一次是用選擇培養(yǎng)基篩選得到雜交瘤細(xì)胞；第二次是進(jìn)行專一抗體檢測(cè)，獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞。