【題目】泡膜運(yùn)輸是介導(dǎo)真核細(xì)胞蛋白質(zhì)分泌途徑的主要方式�？茖W(xué)家已經(jīng)成功鑒定出三種運(yùn)輸小泡：網(wǎng)格蛋白有被小泡，COPⅠ有被小泡和COPⅡ有被小泡。其中COPⅠ有被小泡上的ε-COP蛋白在高爾基體內(nèi)部以及高爾基體與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)之間的蛋白質(zhì)運(yùn)輸中發(fā)揮了關(guān)鍵作用�？茖W(xué)家通過一定的技術(shù)手段，制備了水稻ε-COP蛋白的單克隆抗體。

（1）利用PCR技術(shù)擴(kuò)增水稻ε-COP蛋白基因，PCR反應(yīng)需在一定的緩沖溶液中才能進(jìn)行，主要成分包括：DNA模板、_________________，4種脫氧核苷酸和________________。

（2）研究人員通過一定的技術(shù)手段，將ε-COP蛋白基因與運(yùn)載體結(jié)合，得到下圖1所示重組表達(dá)載體，據(jù)圖

①該重組表達(dá)載體用到的限制酶是___________________。研究人員將其導(dǎo)入大腸桿菌常用方法是___________________。

②接下來研究人員將轉(zhuǎn)化后的大腸桿菌接種在含有________________________的培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時(shí)間，長出的菌落即為轉(zhuǎn)化成功的大腸桿菌。

③研究人員以大腸桿菌作為受體細(xì)胞，相對酵母菌而言，具有________________________________（答出兩點(diǎn)即可）等優(yōu)點(diǎn)。

（3）利用聚丙烯酰胺凝膠電泳將重組水稻ε-COP蛋白提純后，取適量重組蛋白分多次皮下注射家兔，10天后大量采血收集抗血清。注射的重組蛋白相當(dāng)于______________________，多次注射的目的是：_________________________。

【答案】2種引物 Taq DNA聚合酶 BamH I和Xho I CaCl2轉(zhuǎn)化法 氨芐青霉素（Amp） 結(jié)構(gòu)簡單、繁殖快、易培養(yǎng)、遺傳物質(zhì)相對較少、外源蛋白表達(dá)量高（答出兩點(diǎn)即可） 抗原 產(chǎn)生大量的漿細(xì)胞，分泌更多抗體

【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA——分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)——抗原——抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）PCR反應(yīng)需在一定的緩沖溶液中才能進(jìn)行，主要成分包括：DNA模板、2種（一對）引物、4種脫氧核苷酸和耐高溫的DNA聚合酶（Taq酶）。

（2）①由圖可知，該重組表達(dá)載體用到的限制酶是BamH I和Xho I。大腸桿菌屬于微生物細(xì)胞，將基因表達(dá)載體導(dǎo)入大腸桿菌常用方法是CaCl2轉(zhuǎn)化法（感受態(tài)細(xì)胞法）。

②由圖可知，該表達(dá)載體的標(biāo)記基因是氨芐青霉素抗性基因，故將轉(zhuǎn)化后的大腸桿菌接種在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時(shí)間，篩選出來的菌落即為轉(zhuǎn)化成功的大腸桿菌。

③相對酵母菌而言，大腸桿菌作為受體細(xì)胞具有結(jié)構(gòu)簡單、繁殖快、易培養(yǎng)、遺傳物質(zhì)相對較少、外源蛋白表達(dá)量高等優(yōu)點(diǎn)。

（3）注射的重組蛋白相當(dāng)于抗原，多次注射的目的是產(chǎn)生大量的漿細(xì)胞，分泌更多抗體。

練習(xí)冊系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】如圖為人體內(nèi)環(huán)境的局部示意圖，請據(jù)圖回答下列問題：

（1）內(nèi)環(huán)境主要由圖中________（填標(biāo)號(hào)）組成。其功能是________________________________（答兩點(diǎn)）。

（2）若花粉等過敏原引起過敏反應(yīng)，會(huì)使圖中________（填標(biāo)號(hào)）的通透性增大，________（填標(biāo)號(hào)）增多導(dǎo)致水腫。

（3）此圖表示細(xì)胞與周圍環(huán)境的關(guān)系，其中③中________與的運(yùn)輸有關(guān)。其內(nèi)的氧氣濃度________（一定、不一定）高于血漿。

（4）④中存在________，它們對于維持pH值的穩(wěn)定有重要意義。

（5）人體維持穩(wěn)態(tài)的能力是有限的，當(dāng)________或________時(shí)，其穩(wěn)態(tài)會(huì)遭到破壞。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】在某草原，由于開采煤礦，植被被破壞消失，土壤變得更干旱貧瘠。科研人員對該煤礦廢棄后植被恢復(fù)情況進(jìn)行了多年追蹤調(diào)查，結(jié)果如下表。

第1年

第5年

第10年

第15年

第25年

物種數(shù)

8

19

20

40

48

優(yōu)勢種

蒺藜

豬毛菜

反枝莧

灰綠藜

白蓮蒿

蒲公英

鶴虱

狗尾草

白蓮蒿

差不嘎蒿

羊草

寸草苔

差不嘎蒿

羊草

大針茅

寸草苔

大針茅

羊草

克氏針茅

均為一年生植物

鶴虱和狗尾草為一年生植物，其余為多年生

均為多年生植物

均為多年生植物

均為多年生植物

（1）在植物種群密度的調(diào)查中，需依據(jù)植物的________設(shè)置樣方大小，并對樣方中的植物進(jìn)行計(jì)數(shù)。

（2）植被恢復(fù)是恢復(fù)被破壞生態(tài)系統(tǒng)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，從植物在生態(tài)系統(tǒng)中功能角度闡述理由：____________。

根據(jù)表中調(diào)查結(jié)果可知，該植物群落演替的趨勢是______。

（3）該草原生態(tài)系統(tǒng)的一條食物鏈的能量流動(dòng)調(diào)查結(jié)果如下圖：

注：圖中方框內(nèi)的數(shù)字為同化的能量，單位為kcal·ha-1·a-1

①圖中“A”包括___________________________的能量。

②該食物鏈中，第二營養(yǎng)級到第三營養(yǎng)級的能量傳遞效率為________。

③根據(jù)調(diào)查和統(tǒng)計(jì)，評估該系統(tǒng)中的某種鳥的營養(yǎng)級為3．2，請解釋原因：________。

（4）與本地未開發(fā)的草原相比，恢復(fù)中的露天廢棄煤礦生態(tài)系統(tǒng)更容易發(fā)生蟲災(zāi)。從生態(tài)系統(tǒng)穩(wěn)定性的角度分析，發(fā)生該現(xiàn)象的可能原因是________。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】某同學(xué)在觀察蝗蟲精母細(xì)胞減數(shù)分裂裝片時(shí)將處于不同時(shí)期的顯微照片按分裂的先后順序進(jìn)行排列，如下圖甲、乙、丙、丁所示。據(jù)圖分析不合理的是（ ）

A.圖甲可能會(huì)發(fā)生同源染色體的交叉互換

B.圖甲和圖乙所含的染色體組數(shù)目是一致的

C.圖丙細(xì)胞分裂結(jié)束后染色體數(shù)目將減半

D.圖丁形成的細(xì)胞板將其分成四個(gè)精細(xì)胞

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】請根據(jù)下圖所示，分析人體運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度與血液中乳酸含量和氧氣消耗速率的關(guān)系�；卮鹣嚓P(guān)問題：

（1）無氧呼吸過程中，有機(jī)物所釋放的能量，其中，大部分以_______，其余小部分___________。

（2）運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度大于c后，肌肉細(xì)胞CO2的產(chǎn)生量將大于O2消耗量，這種說法是否成立?__________。請說明原因_______________________。

（3）若運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度長時(shí)間超過c，會(huì)因?yàn)?/span>_____________________而使肌肉酸脹乏力。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】在人體的口腔感覺神經(jīng)末梢中，存在香草酸受體，能被辣椒素或髙溫激活。下列說法錯(cuò)誤的是（ ）

A.香草酸受體位于突觸后膜，有特異性

B.辣椒素可與該受體結(jié)合，導(dǎo)致內(nèi)流

C.感覺辛辣的神經(jīng)中樞位于大腦皮層

D.吃辣椒時(shí)喝熱水會(huì)加重疼痛的感覺

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】穿梭載體是一類具有兩種不同復(fù)制原點(diǎn)、能在兩種不同的生物體（物種不同）中復(fù)制的載體，一般在原核生物和真核細(xì)胞中都能復(fù)制和表達(dá)，如Ti質(zhì)粒和哺乳動(dòng)物表達(dá)質(zhì)粒pMT2�；卮鹣铝袉栴}。

（1）構(gòu)建基因表達(dá)載體前，需先獲取目的基因。PCR技術(shù)可用于目的基因的擴(kuò)增，其原理是 ________。用PCR技術(shù)從基因文庫中獲取并擴(kuò)增目的基因，需要加入人工合成的___做為引物；PCR反應(yīng)體系中需加入的原料是____。

（2）若要構(gòu)建一個(gè)穿梭質(zhì)粒，使其能夠在大腸桿菌中大量復(fù)制，且能在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中表達(dá)，質(zhì)粒上除啟動(dòng)子、終止子、多個(gè)限制酶酶切位點(diǎn)和標(biāo)記基因外，還需要有____的復(fù)制原點(diǎn)。

（3）下圖為某種哺乳動(dòng)物穿梭質(zhì)粒示意圖，現(xiàn)欲使用該質(zhì)粒表達(dá)人生長激素，但人生長激素基因所在的DNA片段上不含圖中限制酶識(shí)別序列。為使PCR擴(kuò)增的人生長激素基因定向插入該質(zhì)粒，擴(kuò)增的人生長激素基因兩端設(shè)計(jì)的序列應(yīng)含有____（填下圖中的限制酶名稱）的切割位點(diǎn)。

（4）將該穿梭質(zhì)粒、目的基因混合后形成的重組質(zhì)粒與感受態(tài)的大腸桿菌細(xì)胞混合，完成轉(zhuǎn)化過程，再從培養(yǎng)的大腸桿菌細(xì)胞中提取質(zhì)粒，可獲得大量該質(zhì)粒。在含卡那霉素的培養(yǎng)基中能夠生長的大腸桿菌細(xì)胞中____（填“一定”或“不一定”）含有目的基因，原因是____。

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】某地以沼氣為紐帶，將沼氣池豬禽舍、蔬菜栽培與日光溫室有機(jī)地組合在一起，形成一種典型的新型生態(tài)農(nóng)業(yè)模式。下列有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是（ ）

A.生態(tài)農(nóng)業(yè)改變了生態(tài)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)，減少了廢棄物使能量利用最大化值得推廣

B.該模式實(shí)現(xiàn)了能量的多級利用，提高詞料了人們對能量的利用率

C.沼氣池中的微生物將有機(jī)廢物分解利用，沼渣還田，實(shí)現(xiàn)了物質(zhì)的循環(huán)利用

D.蔬菜是該系統(tǒng)的主要成分，人、牛、豬等均只能從此獲得能量

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科目：高中生物 來源： 題型：

【題目】陽桃是著名的嶺南佳果，在潮汕地區(qū)多有種植。請回答下列問題：

（1）在陽桃成熟過程中，起主要調(diào)節(jié)作用的植物激素是________。這期間，有的酶合成增加了，有的酶合成減少了，說明植物激素作為一種____________(填“信息分子”“生物大分子”或“催化劑”)，對陽桃________的表達(dá)進(jìn)行調(diào)節(jié)。

（2）過氧化氫酶(CAT)有防止細(xì)胞膜損傷和破壞、延緩衰老的作用。陽桃采摘后，如放置在常溫下，幾天后果實(shí)迅速皺縮、變味甚至腐爛，這可能與陽桃CAT的____________密切相關(guān)。

（3）有人進(jìn)行以下實(shí)驗(yàn)，以探究延長陽桃鮮果保存期的措施，結(jié)果如圖所示。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，應(yīng)選擇______________對新采摘的陽桃進(jìn)行保鮮處理。

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同步練習(xí)冊答案