Question

【題目】轉(zhuǎn)基因動(dòng)物是指攜帶外源基因并能表達(dá)和遺傳的一類動(dòng)物，Palmiter等將大鼠的生長激素基因和小鼠的mMT啟動(dòng)子融合，獲得了“超級(jí)小鼠”�；卮鹣铝袉栴}：

（1）將生長激素基因?qū)�入小鼠體內(nèi)常用的方法是___________，在導(dǎo)入目的基因前要構(gòu)建重組質(zhì)粒，重組質(zhì)粒包括目的基因、啟動(dòng)子、_______ 和標(biāo)記基因等，其中標(biāo)記基因的作用是_________________________。

（2）進(jìn)行早期胚胎培養(yǎng)時(shí)，需要加入的物質(zhì)中除了各種營養(yǎng)物質(zhì)外，還需要添加______等天然成分，早期胚胎培養(yǎng)要置于CO2培養(yǎng)箱中，其氣體組成為___________________。

（3）轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的培養(yǎng)需要對(duì)胚胎進(jìn)行移植，胚胎移植技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是________________。

（4）欲獲得基因型完全一樣的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，可利用胚胎分割技術(shù)，進(jìn)行胚胎分割應(yīng)選用的時(shí)期是_____________或囊胚期，其中對(duì)囊胚期進(jìn)行分割時(shí)要將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，目的是___________________________。

Answer 1

【答案】顯微注射法 終止子 便于目的基因的篩選和鑒定 血漿 95%的空氣+5%的CO2 能充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個(gè)體的繁殖潛能 桑椹胚 以免影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育

【解析】

1.基因表達(dá)載體的構(gòu)建是基因工程的核心。一個(gè)基因表達(dá)載體的組成，除了目的基因外還必須有啟動(dòng)子、終止子以及標(biāo)記基因。標(biāo)記基因的作用是為了鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來。

2.將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞，采用最多的方法是農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞，常用顯微注射法，導(dǎo)入微生物細(xì)胞，常用感受態(tài)細(xì)胞法。

3.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件有：無毒、無菌的環(huán)境；營養(yǎng)（在使用合成培養(yǎng)基時(shí)通常需加入血清、血漿等）；溫度和pH；氣體環(huán)境（95%的空氣+5%的CO2）。

4.進(jìn)行胚胎分割時(shí)，應(yīng)選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的桑椹胚或囊胚。分割時(shí)要注意將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，否則會(huì)影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育。

（1）將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞常用的方法是顯微注射法，基因表達(dá)載體包括啟動(dòng)子、終止子、目的基因和標(biāo)記基因等，其中標(biāo)記基因的作用是便于目的基因的篩選和鑒定，將導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細(xì)胞選擇出來。

（2）早期的胚胎培養(yǎng)時(shí)需要加入動(dòng)物血漿，其中可能含有一些未知的，但是對(duì)胚胎發(fā)育有利的物質(zhì)，早期胚胎培養(yǎng)要置于CO2培養(yǎng)箱中，其氣體組成為95%的空氣+5%的二氧化碳。

（3）胚胎移植技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是能充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個(gè)體的繁殖潛能。

（4）胚胎分割應(yīng)對(duì)早期胚胎的桑椹胚或囊胚進(jìn)行分割，其中對(duì)囊胚期進(jìn)行分割時(shí)要將內(nèi)細(xì)胞團(tuán)均等分割，目的是以免影響分割后胚胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育受影響。