科目:高中生物 來源:2015屆吉林省高二上期期末考試生物卷(解析版) 題型:綜合題
PCR技術(shù)是一種DNA的擴(kuò)增技術(shù),操作步驟簡介如下:
第一步:準(zhǔn)備反應(yīng)式溶液和模塊DNA。
A.配制聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)溶液:
配方:按如下比例進(jìn)行配制:蒸餾水100、緩沖溶液15、氯化鎂溶液8、引物13、引物23、DNA聚合酶、礦物油1(防止聚合酶在凍結(jié)時受傷害);dATP、dGTP、dCTP、dTTP每一種各加5。
B.準(zhǔn)備要拷貝的DNA:
提取準(zhǔn)備要拷貝的DNA
(如可以用一牙簽輕刮口腔內(nèi)壁,將牙簽放入蒸餾水中搖動。加熱蒸餾水沸騰,使細(xì)胞破碎放出DNA。用離心機(jī)離心后,去除蒸餾水中較大的細(xì)胞碎片。這時上清液中就有了較純的DNA。)
第二步:聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。
①將要拷貝的DNA“B”放入反應(yīng)液“A”中。
②水浴加熱。首先,94 ℃,使DNA雙螺旋解旋,歷時1 min;然后,56 ℃,使引物結(jié)合到DNA上,歷時90 s;最后,72 ℃,用聚合酶使DNA拷貝,歷時90 s。③重復(fù)步驟②。每重復(fù)一次,即完成一次拷貝。
分析回答下列問題:
(1)以上材料可以說明( 。
A.DNA的復(fù)制必須在活細(xì)胞內(nèi)才能完成
B.DNA能指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成
C.在合適的條件下,非細(xì)胞環(huán)境也能進(jìn)行DNA復(fù)制
D.PCR技術(shù)是一種無性生殖技術(shù)
(2)為什么要加入兩種引物。________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
引物的作用是什么?________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
(3)PCR技術(shù)中用到的DNA聚合酶,取自生長在溫泉中的一種細(xì)菌,就PCR技術(shù)來講,你認(rèn)為使用這種細(xì)菌中提取的酶較普通的動植物體內(nèi)提取的DNA聚合酶的優(yōu)勢是________________________________________________________________________
________________________________________________________________________。
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科目:高中生物 來源:2013屆福建省高二下學(xué)期期末考試生物試卷(解析版) 題型:選擇題
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)中用到的Taq酶作用的適宜溫度大約是
A. 55~60℃ B. 70~75℃ C. 90~95℃ D. 37℃
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科目:高中生物 來源: 題型:閱讀理解
回答下列有關(guān)基因工程和克隆技術(shù)的問題。(10分)
2006年12月22日,我國首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬在東北農(nóng)業(yè)大學(xué)的種豬場自然分娩產(chǎn)出,這標(biāo)志著我國在轉(zhuǎn)基因克隆豬技術(shù)領(lǐng)域已達(dá)到世界領(lǐng)先水平。下圖為我國首例綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖,請據(jù)圖回答:
63、說出綠色熒光蛋白轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程中用到了哪些生物工程技術(shù)?
利用了哪些原理? (本題答案從下列所給選項中選擇填寫)
①轉(zhuǎn)基因技術(shù);②細(xì)胞核移植技術(shù);③胚胎移植技術(shù);④干細(xì)胞技術(shù);⑤動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)
⑥基因突變;⑦基因重組;⑧動物細(xì)胞核具有全能性;⑨動物細(xì)胞具有全能性
64、過程①②中必需用到的酶分別是 和 。綠色熒光蛋白基因之所以能與質(zhì)粒重組,原因是 。
65、早期胚胎的培養(yǎng)液成分較復(fù)雜,除一些無機(jī)鹽和有機(jī)鹽類外,還需添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分,以及 等物質(zhì)。
通過上圖中過程①的方法獲取目的基因的數(shù)量是有限的,要獲得大量的綠色熒光蛋白基因可以利用PCR技術(shù)。PCR擴(kuò)增反應(yīng)(如下圖所示)中加入的TaqDNA聚合酶能在接近沸點的條件下,發(fā)揮延伸DNA子鏈的作用,將單個脫氧核苷酸連續(xù)結(jié)合到雙鏈DNA片段的引物鏈上。請回答:
PCR(DNA聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))技術(shù)示意圖:
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66、你認(rèn)為TaqDNA聚合酶一定是從下列哪種生物體細(xì)胞中分離提取的?
A.水母細(xì)胞 B.豬胎兒成纖維細(xì)胞 C.極端嗜熱菌 D.大腸桿菌
67、下面的表達(dá)式不能反映TaqDNA聚合酶的功能,為什么? 。
68、用限制酶EcoRV、MboI單獨或聯(lián)合切割同一種質(zhì)粒,得到DNA片段長度如下圖(1kb即1000個堿基對),請在答題卡的指定位置畫出質(zhì)粒上EcoRV、MboI的切割位點和標(biāo)出堿基對數(shù)。(2分)
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