Question

【題目】在培育轉(zhuǎn)基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作為標記基因，只有含卡那霉素抗性基因的細胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長。下圖為獲得抗蟲棉的技術(shù)流程。請據(jù)圖回答：

請據(jù)圖回答：

（1）A過程需要的酶有________________________。

（2）B過程及其結(jié)果體現(xiàn)質(zhì)粒作為運載體必須具備的兩個條件是________________________________。

（3）C過程的培養(yǎng)基條含有必要物質(zhì)、瓊脂和激素外，還必須加入____________。

（4）如果利用DNA分子雜交原理對再生植株進行檢測，D過程應(yīng)該用____________作為探針。

Answer 1

【答案】 限制性內(nèi)切酶和DNA連接酶 具有標記基因能在宿主細胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存 卡那霉素 放射性同位素（或熒光分子）標記的抗蟲基因

【解析】試題分析：根據(jù)題意和圖示分析可知，圖中A表示基因表達載體的構(gòu)建過程；B表示用選擇培養(yǎng)基篩選含有重組質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌的過程；C表示脫分化過程；D表示轉(zhuǎn)基因抗蟲植株的檢測。

（1）圖中A為基因表達載體的構(gòu)建過程，該過程需要限制酶切割含有目的基因的外源DNA分子和運載體，還需DNA連接酶將目的基因和運載體連接形成重組質(zhì)粒。

（2）B過程是培養(yǎng)并選擇含有重組質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌，其中“選擇”體現(xiàn)了質(zhì)粒作為運載體必須具備具有標記基因；“培養(yǎng)”體現(xiàn)了質(zhì)粒作為運載體必須能在宿主細胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存。

（3）C過程表示脫分化過程，主要是進行誘導選擇，既要誘導出愈傷組織還要進行篩選，篩選出被含重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌侵染的葉片細胞，淘汰掉普通細胞，根據(jù)其標記基因是卡那霉素抗性基因判斷應(yīng)添加卡那霉素。

（4）如果要檢測轉(zhuǎn)基因是否成功，D過程最好采用放射性同位素標記的抗蟲基因作為探針，利用DNA分子雜交原理進行檢測。