Question

動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞工程的基礎(chǔ)，在動(dòng)物細(xì)胞工程的其他技術(shù)中都得廣泛應(yīng)用（如下圖）。下面是與動(dòng)物細(xì)胞工程相關(guān)的問(wèn)題，請(qǐng)分析回答：

（1）在進(jìn)行動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，首先要將動(dòng)物組織剪碎，然后用　　　　處理，以分散成單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸液。

（2）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，要保證細(xì)胞必需的營(yíng)養(yǎng)、適宜的溫度　和pH條件，還要提供無(wú)菌、無(wú)毒和適宜的氣體環(huán)境。為達(dá)到無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境條件，除了要對(duì)培養(yǎng)液和培養(yǎng)器具進(jìn)行消毒外，還要①　　　　　，②　　　　　。氣體環(huán)境中CO₂的作用是　　　　。

（3）應(yīng)用于核移植的供體細(xì)胞一般選用傳代10代以內(nèi)的細(xì)胞，原因是　　　　　　　。

（4）下圖表示單隆抗體的制備過(guò)程，請(qǐng)分析回答：

①給小鼠注射特定抗原后產(chǎn)生的、與骨髓瘤細(xì)胞融合的細(xì)胞是　　　　。

②在細(xì)胞融合的過(guò)程中，常用的化學(xué)誘導(dǎo)劑是　　　　；培養(yǎng)液中的細(xì)胞類型有　　　。（小鼠產(chǎn)生的細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞分別用A、B表示）

③篩選出的雜交瘤細(xì)胞所表現(xiàn)出的優(yōu)良性狀是　　　　　　　　　　　　　　。

 

Answer 1

【答案】

（9分）（1） 胰蛋白酶（膠原蛋白酶）　

（2）①在培養(yǎng)液中加入一定量的抗生素�、诙ㄆ诟鼡Q培養(yǎng)液　、

　　　　　　　維持培養(yǎng)液的PH　

（3）10代以后的細(xì)胞遺傳物質(zhì)可能發(fā)生改變（或保證供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)）　

（4）①B淋巴細(xì)胞（漿細(xì)胞）　②聚乙二醇（PEG）、AA，BB，AB，A，B　　

　 �、劭稍隗w外條件下，無(wú)限增殖，又能分泌單一抗體

【解析】動(dòng)物細(xì)胞分散開來(lái)通常用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理；如果培養(yǎng)液有雜菌的污染，那么雜菌會(huì)于培養(yǎng)液中的細(xì)胞形成競(jìng)爭(zhēng)關(guān)系，所以要經(jīng)過(guò)處理：滅菌或者添加一定量的抗生素；定期更換培養(yǎng)液，以便清除代謝產(chǎn)物，加入CO2維持PH值的相對(duì)穩(wěn)定，當(dāng)分裂的細(xì)胞生長(zhǎng)到表面相互接觸時(shí)，細(xì)胞就會(huì)停止分裂，這種現(xiàn)象叫做接觸抑制。10代以后的細(xì)胞遺傳物質(zhì)可能發(fā)生改變（或保證供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)），可以作為核移植的供體細(xì)胞，單克隆抗體通常用漿細(xì)胞或經(jīng)免疫的B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合，化學(xué)促融劑通常采用聚乙二醇處理，培養(yǎng)液中融合的細(xì)胞有自身細(xì)胞融合，也有雜交瘤細(xì)胞，還有沒有融合的細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞一方面能產(chǎn)生單一抗體，另一方面也能無(wú)限增殖。