Question

【題目】鐮刀型細(xì)胞貧血癥是一種單基因遺傳病，患者的血紅蛋白分子β一肽鏈第6位氨基酸谷氨酸被纈氨酸代替，導(dǎo)致功能異常�；卮鹣铝袉�(wèn)題：

（1）該病___________（填“可以”或“不可以”）通過(guò)顯微鏡觀察檢測(cè)。

（2）從正常人的早期紅細(xì)胞中提取β________為模板，在β________酶的作用下反轉(zhuǎn)錄合成cDNA。再以________的方法，對(duì)所得的cDNA進(jìn)行檢測(cè)，篩選出血紅蛋白基因。

（3）將正常的血紅蛋白基因?qū)�入患者的骨髓造血干�?xì)胞中，再將導(dǎo)入成功的造血干細(xì)胞重新輸人患者體內(nèi)可以成功治療該病，該治療過(guò)程屬于________（填“體內(nèi)”或“體外”） 基因治療。此操作________（填“屬于”或“不屬于”）蛋白質(zhì)工程，理由是該操作________。

Answer 1

【答案】可以??? mRNA??? 逆轉(zhuǎn)錄??? DNA分子雜交（基因檢測(cè)）??? 體外??? 不屬于??? 沒(méi)有對(duì)現(xiàn)有的蛋白質(zhì)進(jìn)行改造（或沒(méi)有對(duì)基因進(jìn)行修飾）???

【解析】

1.基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因用DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA用分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白用抗原―抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

2.蛋白質(zhì)工程指以蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)規(guī)律及其與生物功能的關(guān)系作為基礎(chǔ)，通過(guò)基因修飾或基因合成，對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行基因改造，或制造一種新的蛋白質(zhì)，以滿足人類(lèi)的生產(chǎn)和生活的需要。

（1）鐮刀型細(xì)胞貧血癥患者的紅細(xì)胞由圓餅型變成了鐮刀型，所以該病可以通過(guò)顯微鏡觀察檢測(cè)。

（2）從正常人的早期紅細(xì)胞中提取mRNA為模板，在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化作用下反轉(zhuǎn)錄合成cDNA，再以DNA分子雜交的方法，對(duì)所得的cDNA進(jìn)行檢測(cè)，篩選出血紅蛋白基因。

（3）將正常的血紅蛋白基因?qū)�入患者的骨髓造血干�?xì)胞中，再將導(dǎo)入成功的造血干細(xì)胞重新輸入患者體內(nèi)，可以合成正常血紅蛋白達(dá)到治療目的,該治療過(guò)程屬于體外基因治療。該過(guò)程中由于沒(méi)有對(duì)現(xiàn)有蛋白質(zhì)進(jìn)行改造，也沒(méi)有對(duì)基因進(jìn)行修飾，因此不屬于蛋白質(zhì)工程。