①卵母細胞的收集和體外培養(yǎng)：從屠宰場水牛的卵巢中收集并處理卵母細胞，隨機分成5組，分別置于不同濃度亞麻酸的培養(yǎng)液中，在39℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)22～24h。

②卵母細胞成熟判斷：在顯微鏡下觀察卵母細胞，判斷其是否成熟，統(tǒng)計結(jié)果如表1。

③體外受精：在受精溶液中進行體外受精后，用顯微鏡觀察判斷是否完成受精。

④早期胚胎培養(yǎng)：將受精卵移入胚胎培養(yǎng)液中培養(yǎng)44～48h后檢查分裂情況，每隔48h 更換一次培養(yǎng)液，第5～9天觀察囊胚發(fā)育情況，統(tǒng)計結(jié)果如表2。

（1）步驟①中，細胞培養(yǎng)箱中加5% CO2 的作用是_________________。

（2）步驟②中，成熟卵母細胞內(nèi)染色體的行為特征是_____________________________，步驟③中，判斷是否受精的依據(jù)是在卵細胞膜和透明帶的間隙可否觀察到_____________。

（3）步驟④中，受精卵經(jīng)過卵裂期、________（時期）發(fā)育成囊胚，培養(yǎng)過程定期更換培養(yǎng)液的目的是_______________________、__________________________。

（4）根據(jù)實驗數(shù)據(jù)分析，亞麻酸溶液為200μmol·L-1 時，對水牛卵母細胞體外成熟和囊胚發(fā)育起________作用。

（5）本實驗結(jié)果表明，______________μmol·L-1的亞麻酸對水牛卵母細胞體外成熟和囊胚發(fā)育都較有利，其判斷依據(jù)是__________________________________________________。

（1）將鼠細胞和人細胞在CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段時間，用_____處理，獲取實驗用的單細胞懸液。

（2）將兩種細胞在37℃下混合培養(yǎng)，在培養(yǎng)液中加入_______誘導融合，形成融合細胞，一般兩兩融合的細胞有____種。

（3）細胞膜的主要成分是______和蛋白質(zhì)。將連接了熒光染料的抗體與融合細胞在一定條件下培養(yǎng)，抗體與融合細胞的膜蛋白(抗原)特異性結(jié)合，其目的是標記膜蛋白，以便于顯微鏡觀察。用熒光顯微鏡觀察融合細胞表面熒光的顏色和____，開始時，鼠的細胞為綠色，人的細胞為紅色，兩種顏色不混合；一段時間后，可觀察到紅綠熒光交替分布的“嵌合體”。統(tǒng)計______，結(jié)果如下圖所示。

（4）科學家據(jù)此提出兩種假說解釋嵌合體的形成。

假說一：融合細胞合成了新的膜蛋白；

假說二：原有膜蛋白在細胞膜平面上運動。

①使用_______抑制劑和ATP合成抑制劑分別處理融合細胞，均對嵌合體形成沒有顯著影響，這個結(jié)果否定了假說一。

②在15℃、20℃、26℃的培養(yǎng)溫度下重復上述實驗，這些實驗的結(jié)果為________，為假說二提供了證據(jù)支持。

【題目】數(shù)量性狀通常顯示出一系列連續(xù)的表現(xiàn)型。現(xiàn)有控制某高等植物植株高度的兩對等位基因A、a和B、b（已知這兩對基因位于一對同源染色體上），以累加效應決定植株高度，且每個顯性基因的遺傳效應是相同的。純合子AABB高50cm，aabb高30cm。這兩個純合子雜交得到，產(chǎn)生四種配子的比例為3：3：2：2。自交得到，在中，表現(xiàn)40cm高度的個體所占比例為

A.37.5%B.34%C.26%D.8%

（1）以該植物的綠色葉片和白色花瓣作為外植體，在一定條件下進行組織培養(yǎng)，均能獲得試管苗，其原理是________________________。

（2）若想培育一株新品種，既有此植物的性狀還有其他植物的性狀，理論上可以采用______________技術(shù)，細胞融合成功的標志是雜種細胞再生出新的____________，該技術(shù)的優(yōu)點是_______________________________。

（3）圖中A、B、C所示的是不同的培養(yǎng)結(jié)果，該不同結(jié)果的出現(xiàn)主要是由于培養(yǎng)基中兩種激素用量的不同造成的，這兩種激素是_________________，A中的愈傷組織是葉肉細胞經(jīng)__________形成的。

（4）若該種植物是一種雜合體的名貴花卉，要快速獲得與原植株基因型和表現(xiàn)型都相同的該種花卉，可用組織培養(yǎng)方法繁殖，在培養(yǎng)時，___________（填“能”或“不能”）采用花藥離體培養(yǎng)，原因是__________________________________________________。

注：Ampr/Kmr分別為氨芐青霉素/卡那霉素抗性基因。origin為復制原點，其余為限制酶酶切位點。

（1）對雙子葉植物進行基因工程改造最常用的方法是____________，還需結(jié)合__________技術(shù)才能獲得新性狀的植株。

（2）中間載體通常用______________法導入微生物中擴增，含有中間載體②PrbcS*T的微生物________（“能”或“不能”）在含有卡那霉素的培養(yǎng)基中生長，________（“能”或“不能”）在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基中生長。

（3）經(jīng)酶切后凝膠電泳，測得2B片段為0.4kb，經(jīng)圖示信息分析，Prbcs*T的長度約為____________________。據(jù)圖分析，中間載體②2B形成中間載體②PrbcS*T，需要使用限制酶_________________切割。

（4）在T基因前“點突變引入NcoⅠ”酶切位點的方法是：設(shè)計包含_________識別序列的引物，然后用PCR技術(shù)擴增。

A. 改變通入氣體種類，可以研究呼吸作用類型對發(fā)酵的影響

B. 果酒發(fā)酵中期通入氮氣，酵母菌將從有氧呼吸轉(zhuǎn)變?yōu)闊o氧呼吸

C. 果醋的發(fā)酵周期與實驗設(shè)定的溫度密切相關(guān)

D. 氣體入口與氣體出口可以交換使用

材料與用具：小鼠肺癌細胞懸浮液、物質(zhì)X、癌細胞培養(yǎng)液、生理鹽水、蒸餾水、活細胞檢測儀、細胞培養(yǎng)瓶等（說明：對動物細胞的培養(yǎng)過程和檢測方法不做具體要求）

（1）肺癌細胞是由正常細胞轉(zhuǎn)化而來，除保留了原來細胞的某些特點外，其中最重要的特征是能無限增殖和細胞表面________減少。

（2）實驗思路：

①取五個大小相同的細胞培養(yǎng)瓶，編號為A、B、C、D、E，每組加入等量的肺癌細胞懸浮液和_____________，并測定初始細胞數(shù)。

②在B～E組中依次加入_________________不同濃度的物質(zhì)X（濃度分別為1．0μg/mL、2．0μg/mL、3．0μg/mL、4．0μg/mL），A組則加入___________作為對照；每組設(shè)置三個重復樣品。

③以上各組均置于______________。

④檢測與數(shù)據(jù)處理：分別在24h、48h、72h時取樣檢測各組存活的細胞數(shù)，取____值，求細胞存活率（細胞存活率=實驗組／對照組×100％）。

（3）實驗結(jié)果見下圖∶

根據(jù)實驗結(jié)果得出實驗結(jié)論______________________。

A. 作為受體大腸桿菌應不含氨芐青霉素抗性基因，以便于篩選

B. 若大腸桿菌的菌落為藍色，則質(zhì)粒未導入大腸桿菌

C. 選擇培養(yǎng)基中除必需的營養(yǎng)物質(zhì)外，還應加入適量氨芐青霉素

D. 應選擇白色菌落的大腸桿菌進行擴大培養(yǎng)

A.蛙的紅細胞B.霍亂弧菌C.HIN1病毒D.皮膚癌細胞

A. 過程①選擇胚胎干細胞作受體細胞是因為其具有發(fā)育全能性

B. 過程②中必須通過一定方法篩選含有目的基因的胚胎干細胞

C. 過程③中導入囊胚的細胞數(shù)不同，子代小鼠的性狀一定相同

D. 過程④中為提高成功率，需對代孕母鼠進行超數(shù)排卵處理