Question

【題目】利用基因工程技術(shù)培育轉(zhuǎn)基因生物生產(chǎn)可食用疫苗，將會克服常規(guī)疫苗使用時所面臨的諸多問題．下圖是部分過程示意圖，其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ為四種限制性內(nèi)切酶

（1）質(zhì)粒DNA分子中的兩條鏈靠_____鍵維系成雙鏈結(jié)構(gòu)。

（2）以下說法錯誤的有_____

A．構(gòu)建含抗原基因的表達載體時應選用限制酶PstⅠ和EcoRⅠ

B．抗卡那霉素基因的存在將有利于篩選含有抗原基因的細胞

C．抗原基因能和質(zhì)粒重組是它們都是有四種脫氧核糖核苷酸構(gòu)成的雙螺旋結(jié)構(gòu)

D．DNA連接酶不具有專一性體現(xiàn)在可連接任何兩個脫氧核苷酸之間的化學鍵

（3）用Pst I、Sma I、EcoR I兩兩聯(lián)合酶切含目的基因的DNA和質(zhì)粒的結(jié)果見表．據(jù)表所列酶切結(jié)果判斷目的基因的大小為_____kb，若用Pst I、Sma I、EcoR I三酶聯(lián)合酶切表達載體，下列可獲得的片段長度有_____．

酶切結(jié)果（1kb＝1000堿基對）

	Pst I+Sma I	Sma I+EcoR I	Pst I+EcoR I
含抗原基因 的DNA	1.2kb 0.9kb 0.1kb	1.3kb 0.6kb 0.3kb	1.2kb 0.6kb 0.4kb
質(zhì)粒	2.9kb 0.8kb	3.0kb 0.7kb	2.2kb 1.5kb

A．2.9kb　　　B．0.3kb　　　C．2.5kb　　　D．0.7kb　　　E．2.3kb　　　F．0.4kb

（4）動物基因工程通常以受精卵作為受體細胞的根本原因是_____．

A．受精卵能使目的基因高效表達B．受精卵尺寸較大，便于DNA導入操作

C．受精卵基因組更易接受DNA的插入D．受精卵可發(fā)育成動物個體

（5）乳腺生物反應器可以從轉(zhuǎn)基因動物分泌的乳汁中獲得人源性蛋白質(zhì)藥物，但受轉(zhuǎn)基因動物的性別和生長發(fā)育時期的限制影響效益．研究者發(fā)現(xiàn)如果將藥物蛋白基因移到動物如牛、羊的膀胱上皮細胞中表達，利用轉(zhuǎn)基因牛、羊尿液生產(chǎn)提取藥物比乳汁中提取藥物具有更大的優(yōu)越性．你認為這優(yōu)越性的體現(xiàn)是_____。

Answer 1

【答案】氫鍵 D 0.4 BCEF D 處于不同發(fā)育時期的雌雄動物都可生產(chǎn)藥物

【解析】

分析題圖，圖示表示基因表達載體的構(gòu)建過程，是基因工程的核心步驟，圖示中含抗原基因的DNA分子中含有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ三種限制性核酸內(nèi)切酶的識別序列，其中SmaⅠ的識別序列位于目的基因上；質(zhì)粒中含有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ四種限制性核酸內(nèi)切酶的識別序列。

（1）質(zhì)粒DNA分子中的兩條鏈靠氫鍵鍵維系成雙鏈結(jié)構(gòu)。

（2）A、含抗病基因的DNA含有限制酶PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ的切割位點，但限制酶SmaⅠ的切割位點位于抗病基因上，對SmaⅠ位點進行切割破壞了抗病基因的結(jié)構(gòu)，所以要獲得抗病基因，不能否用限制酶SmaⅠ對圖中對應的位點進行切割。因此，要獲得含抗病基因的重組質(zhì)粒，應選用PstⅠ、EcoRⅠ限制酶切割質(zhì)粒，A正確；

B、抗卡那霉素基因作為標記基因，主要作用是篩選含有目的基因（抗原基因）的受體細胞，B正確；

C、抗原基因能和質(zhì)粒重組是因為它們都是有四種脫氧核糖核苷酸構(gòu)成的雙螺旋結(jié)構(gòu)，C正確；

D、酶都具有專一性，DNA連接酶的專一性體現(xiàn)在只能連接兩個DNA片段之間的磷酸二酯鍵，D錯誤。

故選D。

（3）分析圖解結(jié)合表格可知，切割含抗原基因的DNA時，用Pst I+Sma I或Pst I+EcoR I中利用了同種Pst I，因此比較片段可知，Pst I酶左側(cè)片段為1.2kb；用Sma I+EcoR I或Pst I+EcoR I中都利用了EcoR I，因此EcoR I酶切位點的右側(cè)片段為0.6kb，因此根據(jù)酶切片段結(jié)果可知，目的基因的大小為0.4kb；結(jié)合表格中質(zhì)粒的切割片段可知，質(zhì)粒左側(cè)PstⅠ與EcoRⅠ段的片段為2.2，而目的基因可以被Sma I切割成0.1kb和0.3kb兩種片段，因此若用Pst I、Sma I、EcoR I三酶聯(lián)合酶切表達載體，可獲得的片段長度有0.3kb、2.5kb、2.3kb、0.4kb、0.1 kb、2.2 kb，故選BCEF。

（4）動物基因工程通常以受精卵作為受體細胞的根本原因是動物體細胞的全能性受到限制，不能表現(xiàn)出來，而受精卵的全能性最高，可以發(fā)育成完整的動物個體，故選D。

（5）從轉(zhuǎn)基因牛羊尿液中提取藥物不受時間和性別的限制，而從動物乳汁中提取藥物則受到限制。