【題目】植物淀粉可分為直鏈淀粉和支鏈淀粉兩種，支鏈淀粉占貯存淀粉的70%-80%，是決定植物果實(shí)或種子品質(zhì)的關(guān)鍵成分。玉米包含SBEⅠ、SBEⅡb和SBEⅡa三種淀粉分支酶，前兩者主要存在于胚乳中，SBEⅡa主要存在于葉片中，它們共同參與支鏈淀粉的合成。育種人員計(jì)劃提取相關(guān)基因構(gòu)建表達(dá)載體，用于改良馬鈴薯性狀。

（1）育種人員以中糯1號(hào)為材料，從玉米籽粒胚乳細(xì)胞中提取________作為模板，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA。

（2）以cDNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增以獲取相應(yīng)基因，該過(guò)程需向反應(yīng)體系中添加的物質(zhì)包括________（列舉3種）。

（3）經(jīng)篩選及測(cè)序，育種人員最終選定長(zhǎng)度為2719bp的SBEⅡb基因?yàn)槟康幕�，與載體經(jīng)________酶處理，重組后構(gòu)建表達(dá)載體，導(dǎo)入大腸桿菌構(gòu)建文庫(kù)。為檢測(cè)導(dǎo)入效果，選取8個(gè)單菌落做PCR擴(kuò)增，結(jié)果如圖。據(jù)此判斷，泳道________對(duì)應(yīng)菌落為成功導(dǎo)入菌落。

將篩選出菌落擴(kuò)大培養(yǎng)后提取質(zhì)粒進(jìn)行酶切實(shí)驗(yàn)，得到如圖所示結(jié)果，該結(jié)果可進(jìn)一步證明上述結(jié)論。理由是________。

（4）GUS基因在組織細(xì)胞表達(dá)后，特定條件下可表現(xiàn)藍(lán)色，育種人員將該基因與目的基因融合并導(dǎo)入馬鈴薯受體細(xì)胞。若轉(zhuǎn)基因馬鈴薯幼苗呈現(xiàn)藍(lán)色，說(shuō)明________。

（5）為避免外源基因在自然界中擴(kuò)散，造成基因污染，請(qǐng)?zhí)岢鲆豁?xiàng)合理化建議________。

【答案】總RNA（RNA、mRNA） 模板、引物、耐高溫的DNA聚合酶（Taq酶）、脫氧核苷酸 限制酶和DNA連接酶 2，4 菌落質(zhì)粒酶切產(chǎn)物既包含質(zhì)粒，同時(shí)也包含長(zhǎng)度接近3000的目的基因序列 目的基因（淀粉分支酶SBEⅡb基因）已成功導(dǎo)入（馬鈴薯細(xì)胞）并表達(dá) 目的基因?qū)肴~綠體DNA；將目的基因與花粉致死（敗育）基因緊密連鎖同時(shí)導(dǎo)入受體

【解析】

基因工程主要包括四個(gè)步驟：目的基因的獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞、目的基因的檢測(cè)與鑒定，基因文庫(kù)包括基因組文庫(kù)和cDNA文庫(kù)。

（1）提取胚乳細(xì)胞中的mRNA作為模板，才可以逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA；

（2）PCR技術(shù)是在生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)，需要模板、引物、耐高溫的DNA聚合酶（Taq酶）、4種脫氧核苷酸；

（3）目的基因與載體需用同種限制酶剪切，才會(huì)出現(xiàn)相同的末端，目的基因與載體結(jié)合后，需用DNA連接酶處理，使末端重新形成磷酸二酯鍵，在電泳圖中，與M泳道相比，泳道2、4基因長(zhǎng)度接近3000bp，與目的基因2719bp長(zhǎng)度相當(dāng)，根據(jù)提取的質(zhì)粒進(jìn)行酶切實(shí)驗(yàn)得到結(jié)果可知，1泳道結(jié)果顯示只有質(zhì)粒，2、3泳道結(jié)果顯示質(zhì)粒酶切產(chǎn)物既包含質(zhì)粒，同時(shí)也包含長(zhǎng)度接近3000的目的基因序列；

（4）GUS基因在組織細(xì)胞表達(dá)后，特定條件下可表現(xiàn)藍(lán)色，利用這個(gè)特性，可讓GUS基因作為標(biāo)記基因與目的基因一起構(gòu)建載體導(dǎo)入受體細(xì)胞，可作為目的基因檢測(cè)與鑒定的指標(biāo)，若轉(zhuǎn)基因馬鈴薯幼苗呈現(xiàn)藍(lán)色，說(shuō)明目的基因（淀粉分支酶SBEⅡb基因）已成功導(dǎo)入（馬鈴薯細(xì)胞）并表達(dá)；

（5）避免外源基因在自然界中擴(kuò)散，造成基因污染，可以目的基因?qū)肴~綠體DNA，形成的花粉不含葉綠體，不會(huì)造成擴(kuò)散；將目的基因與花粉致死（敗育）基因緊密連鎖同時(shí)導(dǎo)入受體，花粉致死就不會(huì)造成擴(kuò)散。

練習(xí)冊(cè)系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

【題目】圖甲為某種細(xì)胞內(nèi)的基因表達(dá)過(guò)程，圖乙中①~⑤表示生理過(guò)程。下列敘述錯(cuò)誤的是

A. 圖甲所示過(guò)程對(duì)應(yīng)圖乙中的②③

B. 圖甲過(guò)程所需的能量由細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)、線粒體提供

C. 圖乙中③過(guò)程中存在2種堿基互補(bǔ)配對(duì)方式

D. 圖乙中①過(guò)程不會(huì)發(fā)生在人體神經(jīng)元的細(xì)胞核中

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

【題目】冠狀病毒的遺傳物質(zhì)是（＋）RNA，其增殖過(guò)程如下圖所示，相關(guān)敘述正確的是（ ）

A.過(guò)程①和②所需要的嘌呤數(shù)相等

B.過(guò)程③所需要的tRNA來(lái)自病毒

C.過(guò)程①②③中的堿基互補(bǔ)配對(duì)方式相同

D.冠狀病毒中存在RNA復(fù)制所需的RNA聚合酶

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

【題目】激素調(diào)節(jié)在植物的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程和對(duì)環(huán)境的適應(yīng)過(guò)程中發(fā)揮著非常重要的作用。并且各種植物激素并不是孤立地起作甩，而是多種激素相互作用共同調(diào)節(jié)。回答下列問(wèn)題：

（1）下圖表示種子萌發(fā)過(guò)程中兩種激素的含量變化：

曲線a代表的激素是_________，作用是__________。

（2）研究發(fā)現(xiàn)，乙烯的產(chǎn)生具有“自促作用”，即乙烯的積累可以刺激更多的乙烯產(chǎn)生。這種乙烯合成的調(diào)節(jié)機(jī)制屬于________調(diào)節(jié)。

（3）在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中，用一定濃度的________作為除草劑，可以除去單子葉農(nóng)作物田間的雙子葉雜草，其原理是_________________。

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

【題目】某細(xì)菌mRNA與對(duì)應(yīng)的翻譯產(chǎn)物如下圖所示，相關(guān)敘述正確的是（ ）

A.一分子mRNA有一個(gè)游離磷酸基團(tuán)，其他磷酸基團(tuán)均與兩個(gè)核糖相連

B.mRNA上的AUG是起始密碼子，它是由基因中的啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄形成

C.在該mRNA合成完全結(jié)束后，核糖體才可以與之結(jié)合并開(kāi)始翻譯過(guò)程

D.蛋白α、β和γ的氨基酸序列完全相同

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

【題目】圖甲表示果蠅卵原細(xì)胞中的一對(duì)同源染色體， 圖乙表示該卵原細(xì)胞形成的卵細(xì)胞中的一條染色體，圖中字母表示基因。下列敘述正確的是（ ）

A.與有絲分裂比，甲→乙的過(guò)程中特有的可遺傳變異是基因重組

B.圖甲中的非等位基因在減數(shù)分裂過(guò)程中不會(huì)發(fā)生基因重組

C.圖乙染色體上存在d 基因的原因一定發(fā)生了基因突變

D.基因D、d的本質(zhì)區(qū)別是堿基對(duì)的種類(lèi)不同

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

【題目】如圖為人體內(nèi)某種信息傳遞機(jī)制模式圖，符合該模型的是（ ）

A.若物質(zhì) C 是神經(jīng)遞質(zhì)，則細(xì)胞 B 是神經(jīng)細(xì)胞

B.若物質(zhì) C 是促性腺激素，則細(xì)胞 A 是下丘腦某細(xì)胞

C.若細(xì)胞 B 是胰島β細(xì)胞，則物質(zhì) C 可能是神經(jīng)遞質(zhì)

D.若細(xì)胞 A 是輔助性 T 淋巴細(xì)胞，則細(xì)胞 B 是細(xì)胞毒性 T 淋巴細(xì)胞

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

【題目】石油污染會(huì)造成某些生物的大量死亡或大量增加，引起生態(tài)系統(tǒng)的變化。運(yùn)用生物修復(fù)技術(shù)已發(fā)展成高效、低成本、環(huán)境友好的污染治理方法，該方法主要是在污染地接種經(jīng)馴化的高效微生物來(lái)提高生物降解污染物的速率。圖1表示馴化降解石油成分菌株S25A1的方法。圖2為不同N∶P對(duì)石油降解的影響。請(qǐng)回答：

（1）在被污染的區(qū)域的S25A1菌能降解石油，該菌的代謝類(lèi)型為________________，屬于生態(tài)系統(tǒng)成分中的________________。

（2）研究人員用基因工程的方法增強(qiáng)S25A1菌株的降解能力，圖中載體的化學(xué)本質(zhì)為________________，除標(biāo)出的抗性基因外，還應(yīng)具有________________和________________的起點(diǎn)。

（3）實(shí)驗(yàn)中接種1的常用方法有________________和________________，將其接種在固體培養(yǎng)基中，該培養(yǎng)基中除了必要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外，還需要添加_______________。

（4）在接種2中使用接種環(huán)接種前，需要用________________方法對(duì)接種環(huán)滅菌處理。

（5）從圖2中可以看出，________________元素含量較高時(shí)，石油能夠迅速降解。該元素在菌體細(xì)胞內(nèi)可參與________________、________________等細(xì)胞結(jié)構(gòu)的物質(zhì)組成。

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科目：高中生物 來(lái)源： 題型：

【題目】圖為中心法則示意圖，相關(guān)敘述正確的是

A.①②③均可發(fā)生在細(xì)胞核和線粒體中

B.②③的堿基配對(duì)方式完全相同

C.細(xì)胞中的tRNA通過(guò)④過(guò)程復(fù)制

D.⑤在逆轉(zhuǎn)錄酶的催化作用下完成

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