Question

【題目】三孢布拉霉菌能夠產(chǎn)生－胡蘿卜素，但大都產(chǎn)量較低。研究表明三孢布拉霉菌細(xì)胞產(chǎn)生的［H］可將無(wú)色的TTC（氯化三苯基四氮唑）還原為紅色復(fù)合物，且菌體細(xì)胞內(nèi)［H］含量越高，還原能力越強(qiáng)，－胡蘿卜素合成能力也越強(qiáng)。研究人員篩選高產(chǎn)菌株及提取－胡蘿卜素的流程如下圖�；卮鹣铝袉�(wèn)題：

（1）圖中的步驟①是對(duì)三孢布拉霉菌液進(jìn)行稀釋，目的是________。在步驟②接種前，應(yīng)對(duì)培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌，常用的方法是________。

（2）為選岀高產(chǎn)菌種，研究人員在步驟②接種用的固體培養(yǎng)基中添加了TTC，培養(yǎng)一段時(shí)間后，在固體培養(yǎng)基上選取目的菌株進(jìn)行步驟③時(shí)，應(yīng)該選擇________的菌落，原因是________。篩選過(guò)程中，多次重復(fù)步驟③和步驟④的目的是________。

（3）從該微生物中提取－胡蘿卜素時(shí)，需要將收集到的菌絲進(jìn)行粉碎和干燥，這是因?yàn)?/span>________等因素會(huì)影響萃取效率。鑒定萃取物中是否含有－胡蘿卜素時(shí)，通常采用的方法是________，該方法也可用于分離葉綠體中的光合色素，其原理是________。

Answer 1

【答案】將菌體分散成單個(gè)細(xì)胞 高壓蒸汽滅菌 周圍紅色較深 周圍紅色較深的菌體細(xì)胞內(nèi)[H]含量高，β—胡蘿卜素合成能力強(qiáng) 增加目的菌株的濃度并不斷純化 原料顆粒大小、含水量 紙層析法 不同色素在層析液中的溶解度不同，因而在濾紙上的擴(kuò)散速度不同

【解析】

胡蘿卜素的提取：

（1）胡蘿卜素的性質(zhì)：胡蘿卜素是橘黃色結(jié)晶，化學(xué)性質(zhì)比較穩(wěn)定，不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有機(jī)溶劑。

（2）胡蘿卜素的提取來(lái)源：提取天然胡蘿卜素的方法主要有：一是從植物中提取；二是從大面積養(yǎng)殖的巖藻中獲得；三是利用微生物的發(fā)酵生產(chǎn)。

（3）萃取劑：最適宜作胡蘿卜素萃取劑的是石油醚。

（4）實(shí)驗(yàn)流程：胡蘿卜→粉碎→干燥→萃�。ㄊ�油醚）→過(guò)濾→濃縮→胡蘿卜素→鑒定（紙層析法）。

（5）胡蘿卜素常用來(lái)治療因缺乏維生素A引起的疾��；還是常用的食品色素；還具有使癌變細(xì)胞恢復(fù)為正常細(xì)胞的作用。

（1）圖中的步驟①是對(duì)三孢布拉霉菌液進(jìn)行稀釋，目的是將菌體分散成單個(gè)細(xì)胞，便于后面在平板上獲得單個(gè)菌落。培養(yǎng)基滅菌常用的方法是高壓蒸汽滅菌。

（2）為選出高產(chǎn)菌種，研究人員在步驟②接種用的固體培養(yǎng)基中添加了TTC，培養(yǎng)一段時(shí)間后，在固體培養(yǎng)基上選取目的菌株進(jìn)行步驟③時(shí)，應(yīng)該選擇周圍紅色較深的菌落，因?yàn)橹車�紅色較深菌落中的菌體細(xì)胞內(nèi)[H]含量高，β—胡蘿卜素合成能力強(qiáng)。篩選過(guò)程中，多次重復(fù)步驟③和步驟④的目的

是將目的菌株擴(kuò)大培養(yǎng)后重復(fù)篩選不斷純化，以期獲得更加高產(chǎn)的菌種。

（3）從該微生物中提取β—胡蘿卜素時(shí)，需要將收集到的茵絲進(jìn)行粉碎和干燥，這是因?yàn)樵�料顆粒大小、含水量等因素會(huì)影響萃取效率。通常采用紙層析法鑒定萃取物中是否含有β一胡蘿卜素，紙層析法也可用于分離葉綠體中的光合色素，其原理是不同色素在層析液中的溶解度不同，因而在濾紙上的擴(kuò)散速度不同。