Question

【題目】某研究小組從牛的瘤胃中采集樣本，進(jìn)行分解尿素的微生物的分離與計(jì)數(shù)。實(shí)驗(yàn)基本步驟如下：請(qǐng)回答

（1）分解尿素的微生物含有_______________，因此，配制培養(yǎng)基時(shí)以尿素作為唯一氮源，尿素會(huì)被分解成_________使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)。培養(yǎng)基中添加___________作為指示劑，可使目標(biāo)菌落的周圍產(chǎn)生紅色環(huán)帶。

（2）該小組在接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是__________________；然后將1mL瘤胃樣液稀釋1000倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0．1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板的菌落數(shù)分別為49、47和45。據(jù)此可得出每升瘤胃樣液中分解尿素的微生物活菌數(shù)為__________，理論上，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)_____（低、等、高）于接種的實(shí)際活菌數(shù)目。

Answer 1

【答案】 脲酶（分解尿素的酶） 氨（NH3） 酚紅 檢測(cè)培養(yǎng)基滅菌是否合格 4.7×108 低

【解析】【試題分析】

本題考查微生物的分離、鑒別與培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，意在考查學(xué)生識(shí)記并理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系，能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與原理，對(duì)各小題做出合理的和解答的能力�？忌�可根據(jù)題意梳理所學(xué)相關(guān)知識(shí)，對(duì)各小題進(jìn)行分析作答。

（1）分解尿素的微生物含有脲酶（分解尿素的酶），因此，配制培養(yǎng)基時(shí)以尿素作為唯一氮源，尿素會(huì)被分解成氨（NH3）使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)；培養(yǎng)基中添加酚紅作為指示劑，可使目標(biāo)菌落的周圍產(chǎn)生紅色環(huán)帶。

（2）接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板培養(yǎng)一段時(shí)間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落生成，用來進(jìn)行對(duì)照，以檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格；根據(jù)題意可知，3個(gè)平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)C＝(49＋47＋45) ÷3＝47個(gè)，涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積V＝0.1mL，稀釋倍數(shù)M＝103，所以每毫升瘤胃樣液中分解尿素的微生物活菌數(shù)為(C÷V)×M＝(47÷0.1)×103＝4.7×105個(gè)，則每升瘤胃樣液中分解尿素的微生物活菌數(shù)為4.7×105×103＝4.7×108個(gè)。當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落，因此，理論上，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往低于接種的實(shí)際活菌數(shù)目。