Question

【題目】科研人員采用如圖所示的育種流程獲得抗蟲大豆新品種。請回答：

（1）常用___________技術(shù)擴增抗蟲基因，將抗蟲基因插入到T質(zhì)粒上的T-DNA的原因是____________________________________________。

（2）在構(gòu)建基因表達載體時為防止酶切產(chǎn)物自身環(huán)化，切割質(zhì)粒時需用___________種限制，酶，酶切后形成的黏性末端序列應(yīng)___________(填“相同”或“不同”)。

（3）將基因表達載體導(dǎo)入農(nóng)桿菌時應(yīng)用___________處理農(nóng)桿菌，使農(nóng)桿菌處于___________的生理狀態(tài)，這種細胞稱為感受態(tài)細胞。

（4）大豆外植體通過誘導(dǎo)形成愈傷組織的過程稱為___________，愈傷組織通過再分化形成植株。該過程利用的原理是___________。

Answer 1

【答案】PCR Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細胞，并整合到受體細胞染色體DNA上 2 不同 Ca2+（CaCl2） 一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子 脫分化 植物細胞全能性

【解析】

利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將抗蟲基因?qū)�入植物細胞，�?gòu)建重組Ti質(zhì)粒時，需將含抗蟲基因的DNA片段插入到Ti質(zhì)粒DNA的T-DNA區(qū)域上，農(nóng)桿菌侵染植物細胞后，可以使抗蟲基因插入到植物細胞中染色體的DNA上。要把重組質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌，首先必須用Ca2+處理土壤農(nóng)桿菌，使土壤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)變?yōu)楦惺軕B(tài)，然后將重組質(zhì)粒和感受態(tài)細胞在緩沖液中混合培養(yǎng)完成轉(zhuǎn)化過程。

（1）常用PCR技術(shù)擴增抗蟲基因，將抗蟲基因插入到T質(zhì)粒上的T-DNA的原因是Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細胞，并整合到受體細胞染色體DNA上。

（2）在構(gòu)建基因表達載體時為防止酶切產(chǎn)物自身環(huán)化，切割質(zhì)粒時需用2種限制，酶切后形成的黏性末端序列應(yīng)不同。

（3）將基因表達載體導(dǎo)入農(nóng)桿菌時應(yīng)用CaCl2處理農(nóng)桿菌，使農(nóng)桿菌處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)，這種細胞稱為感受態(tài)細胞。

（4）大豆外植體通過誘導(dǎo)形成愈傷組織的過程稱為脫分化，愈傷組織通過再分化形成植株。該過程利用的原理是植物細胞全能性。