Question

科學(xué)家通過探究DNA載體途徑的RNA干擾技術(shù)抑制端粒酶的活性，從而抑制腫瘤細(xì)胞生長增殖，以尋找一種抑制腫瘤增長的新途徑。

方法思路：

①構(gòu)建干擾質(zhì)粒________{插入針對人體端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶亞基(hTERT)的mRNA的干擾序列}和對照質(zhì)粒PSG－CTR(插入不針對人體任何DNA序列的對照組序列)。

②用空質(zhì)粒PSG(不含目的基因)、干擾質(zhì)粒PSG－AS和對照質(zhì)粒分別感染肝癌細(xì)胞。

③一段時間后觀察檢測細(xì)胞的________。計算細(xì)胞凋亡率，繪制肝癌細(xì)胞生長曲線。結(jié)果如下圖：

請回答下列問題。

(1)完成方法思路中的空格：

①________；③_____________________________________________________。

(2)在構(gòu)建質(zhì)粒時，要將質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞并用________培養(yǎng)基進(jìn)行篩選鑒定，然后再提取。因此，在構(gòu)建的表達(dá)載體質(zhì)粒上必須含有________。

(3)端粒酶可以通過以自身的________為模板，________為原料來合成端粒DNA。

(4)分析DNA載體途徑的RNA干擾技術(shù)能否抑制腫瘤細(xì)胞的增殖？

Answer 1

(1)題干中指出干擾質(zhì)粒是PSG－AS。題圖中有端粒酶活性細(xì)胞凋亡率、細(xì)胞數(shù)(生長情況)，因此，端粒酶活性、細(xì)胞凋亡情況、細(xì)胞生長情況是檢測指標(biāo)。(2)標(biāo)記基因用于篩選鑒定含有質(zhì)粒的大腸桿菌，用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選鑒定。(3)端粒酶是逆轉(zhuǎn)錄酶，以自身RNA為模板，以脫氧核苷酸為原料，合成端粒DNA。(4)從題圖看出，PSG－AS組端粒酶活性低，細(xì)胞凋亡率高，細(xì)胞數(shù)增長緩慢，能較好地抑制腫瘤細(xì)胞。

答案：(1)①PSG－AS　③端粒酶活性、細(xì)胞凋亡情況、細(xì)胞生長情況

(2)選擇　標(biāo)記基因

(3)RNA　4種脫氧核苷酸

(4)從結(jié)果可知PSG－AS導(dǎo)入肝癌細(xì)胞發(fā)揮作用后，端粒酶活性降低，細(xì)胞凋亡率升高，細(xì)胞生長受抑制，說明通過DNA載體途徑的RNA干擾技術(shù)抑制端粒酶活性的方法，能較好地抑制腫瘤細(xì)胞的增殖。