Question

【題目】某公司在新冠防疫期間推出一款新型免洗洗手凝膠，為衡量該凝膠的清洗效果，研究人員檢測了凝膠洗手前后，手部細菌的數(shù)量。凝膠洗手前后的檢測流程見下圖，回答下列問題：

（1）在進行實驗前需要配置培養(yǎng)基，各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源、___________。如果培養(yǎng)乳酸桿菌，還需要在培養(yǎng)基中添加____________。

（2）為統(tǒng)計洗手前后手部細菌的數(shù)量，應選擇的接種方法是____________。若在M稀釋倍數(shù)下統(tǒng)計出平板上的菌落數(shù)為N，涂布平板時所用的液體體積為V（ml），那么每克樣品中的菌數(shù)為___________，而實際菌數(shù)要比計算值___________。

（3）根據(jù)上圖所示的步驟得出的實驗結(jié)果的可信度較低，為了提高實驗結(jié)果的可信度，請給出兩點建議：______________________、_________________________________。

（4）培養(yǎng)一段時間后可根據(jù)______________________（至少填兩項）等菌落特征初步判斷培養(yǎng)基上菌種的類型。

Answer 1

【答案】無機鹽 維生素（或生長因子） 稀釋涂布平板法 N/V×M 大 同一個稀釋度下涂布三個平板，取三個平板上菌落數(shù)的平均值 設(shè)置一組未接種的空白培養(yǎng)基，排除雜菌污染對實驗結(jié)果造成的干擾 菌落的大小、形狀（隆起程度和顏色）

【解析】

培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機鹽，此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)霉菌時需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細菌時需將pH調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧微生物時則需要提供無氧的條件。單菌落分離法包含平板劃線分離法和稀釋涂布平板法分離，常用于分離獲得單菌落。其中稀釋涂布平板法可用于菌體計數(shù)。

（1）無機鹽對維持生命活動非常重要，各種培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽。有些微生物的培養(yǎng)還需要在培養(yǎng)基中加入生長因子，如培養(yǎng)乳酸桿菌。

（2）為統(tǒng)計洗手前后手部細菌的數(shù)量，應選擇的接種方法是稀釋涂布平板法。若在M稀釋倍數(shù)下統(tǒng)計出平板上的菌落數(shù)為N，涂布平板時所用的液體體積為V（ml），那么每克樣品中的菌數(shù)為N/V×M，由于計數(shù)時當兩個或幾個細胞連在一起時，平板上觀察到的只是一個菌落，所以實際菌數(shù)要比計算值偏大。

（3）為了提高實驗結(jié)果的可信度，需要檢測培養(yǎng)基滅菌是否合格以及在同一稀釋度下計數(shù)多個平板上的菌落數(shù)并求平均值，即提出的建議為：在同一個稀釋度下涂布三個平板，取三個平板上菌落數(shù)的平均值；設(shè)置一組未接種的空白培養(yǎng)基，排除雜菌污染對實驗結(jié)果造成的干擾。

（4）培養(yǎng)一段時間后可根據(jù)菌落的大小、形狀（隆起程度和顏色）等菌落特征初步判斷培養(yǎng)基上菌種的類型。