基因工程利用某目的基因(圖甲)和P1噬菌體載體(圖乙)構(gòu)建重組DNA(圖丙)。限制性核酸內(nèi)切酶的酶切位點(diǎn)分別是BglⅡ(A↓GATCT)、EcoRⅠ(G↓AATTC)和Sau3A Ⅰ(↓GATC)。下列分析合理的是


  1. A.
    用EcoR Ⅰ切割目的基因和P1噬菌體載體
  2. B.
    用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體
  3. C.
    用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體
  4. D.
    用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體
D
試題分析：用EcoR Ⅰ切割目的基因和P1噬菌體載體，產(chǎn)生相同的黏性末端，用DNA連接酶連接時(shí)可能會(huì)發(fā)生反向連接，故A錯(cuò)誤；用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因切割目的基因會(huì)產(chǎn)生兩種DNA片段，一種含有目的基因，一種不含目的基因，故B錯(cuò)誤；用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體，也能產(chǎn)生相同的黏性末端，可能會(huì)發(fā)生反向連接，故C錯(cuò)誤；只有用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和P1噬菌體載體，產(chǎn)生不同的黏性末端，防止發(fā)生方向連接，這樣目的基因插入運(yùn)載體后，RNA聚合酶的移動(dòng)方向肯定與圖丙相同，故D正確。
考點(diǎn)：本題考查基因工程的操作，意在考查考生理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識(shí)與觀點(diǎn)，通過(guò)比較、分析與綜合等方法對(duì)某些生物學(xué)問(wèn)題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論。
練習(xí)冊(cè)系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目：高中生物 來(lái)源：2012-2013學(xué)年湖南省益陽(yáng)市一中高二上學(xué)期期末考試?yán)砜粕镌嚲恚◣Ы馕觯?/span> 題型：綜合題

降鈣素是一種多肽類激素，臨床上用于治療骨質(zhì)疏松癥等。人的降鈣素活性很低，半衰期較短。某科研機(jī)構(gòu)為了研發(fā)一種活性高、半衰期長(zhǎng)的新型降鈣素，將人工合成的降鈣素DNA與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組，并成功的在大腸桿菌中得以表達(dá)。操作大體過(guò)程如下圖1、圖2，據(jù)圖回答下列問(wèn)題：   

（1）圖1示人工合成降鈣素DNA的過(guò)程。從預(yù)期新型降鈣素的功能出發(fā)，推測(cè)相應(yīng)的脫氧核苷酸序列，并人工合成了兩條72個(gè)堿基的DNA單鏈，兩條鏈通過(guò)18個(gè)堿基對(duì)形成部分雙鏈DNA片段，再利用Klenow酶補(bǔ)平，獲得雙鏈DNA。從功能看，Klenow酶是一種___________酶，合成的雙鏈DNA有________個(gè)堿基對(duì)。
（2）圖2將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌最常用的方法是用       處理，使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)。
（3）如果要通過(guò)基因工程獲得轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞最常用的方法是             。
（4）以下關(guān)于蛋白質(zhì)工程的說(shuō)法正確的是（  ）
A．蛋白質(zhì)工程以基因工程為基礎(chǔ)          
B．蛋白質(zhì)工程就是酶工程的延伸
C．蛋白質(zhì)工程就是用蛋白酶對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行改造  
D．蛋白質(zhì)工程只能生產(chǎn)天然的蛋白質(zhì)

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科目：高中生物 來(lái)源：2015屆吉林省高二上期期末考試生物卷（解析版） 題型：綜合題

請(qǐng)回答基因工程方面的有關(guān)問(wèn)題：

(1)利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，其原理與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制類似(如下圖所示)。圖中引物為單鏈 DNA 片段，它是子鏈合成延伸的基礎(chǔ)。

①?gòu)睦碚撋贤茰y(cè)，第四輪循環(huán)產(chǎn)物中含有引物 A 的 DNA 片段所占的比例為_(kāi)_______。

②在第________輪循環(huán)產(chǎn)物中開(kāi)始出現(xiàn)兩條脫氧核苷酸鏈等長(zhǎng)的 DNA 片段。

(2)設(shè)計(jì)引物是 PCR 技術(shù)關(guān)鍵步驟之一。某同學(xué)設(shè)計(jì)的兩組引物(只標(biāo)注了部分堿基序列)都不合理(如下圖)，請(qǐng)分別說(shuō)明理由。

①第 1 組：________________________；

②第 2 組：________________________。

(3)PCR反應(yīng)體系中含有熱穩(wěn)定 DNA 聚合酶，下面的表達(dá)式不能正確反映 DNA 聚合酶的功能，這是因?yàn)開(kāi)___________________________________________________________。

(4)用限制酶 EcoRV 、MboⅠ單獨(dú)或聯(lián)合切割同一種質(zhì)粒，得到的 DNA 片段長(zhǎng)度如下圖(1 kb 即 1 000 個(gè)堿基對(duì))，請(qǐng)畫(huà)出質(zhì)粒上 EcoRV 、MboⅠ的切割位點(diǎn)。

 

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科目：高中生物 來(lái)源：2012-2013學(xué)年浙江省高三高考仿真模擬理科生物試卷 題型：綜合題

肺細(xì)胞中的let一7基因表達(dá)減弱，癌基因RAS表達(dá)增強(qiáng)，會(huì)引發(fā)肺癌。研究人員利用基因工程技術(shù)將let一7基因?qū)敕伟┘?xì)胞實(shí)現(xiàn)表達(dá)增強(qiáng)后，發(fā)現(xiàn)肺癌細(xì)胞的增殖受到抑制。該基因工程技術(shù)基本流程如圖1。

(1)進(jìn)行過(guò)程①時(shí)，需用             酶切開(kāi)載體以插入let一7基因。進(jìn)行過(guò)程②時(shí)，需用         酶處理貼附在培養(yǎng)皿壁上的細(xì)胞，以利于 細(xì)胞培養(yǎng)。采用PCR技術(shù)擴(kuò)增let一7基因時(shí)，在PCR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)包含：擴(kuò)增緩沖液(含Mg2+)、水、4種脫氧核糖核苷酸、模板DNA、耐高溫的DNA聚合酶和引物l和引物Ⅱ等，若在該反應(yīng)體系中，目的基因擴(kuò)增了5代，則具有引物I的DNA所占的比例理論上為        。

(2)研究發(fā)現(xiàn)，let一7基因能影響癌基因RAS的表達(dá)，其影響機(jī)理如圖2。據(jù)圖分析，可從細(xì)胞中提取    進(jìn)行分子雜交，以直接檢測(cè)1et一7基因是否轉(zhuǎn)錄。肺癌細(xì)胞增殖受到抑制，可能是由于細(xì)胞中    (RASmRNA／RAS蛋白質(zhì))含量減少引起的。

(3)現(xiàn)有一長(zhǎng)度為1000堿基對(duì)(bp)的DNA分子，用限制酶切開(kāi)后得到仍是長(zhǎng)度為1000 bp的DNA分子，說(shuō)明此DNA分子的形態(tài)為                  。

(4)某線性DNA分子分別用限制酶Hind Ⅲ和Sma I處理，然后用這兩種酶同時(shí)處理，得到如下片段(kb為千個(gè)堿基對(duì))：

限制酶

    片段及長(zhǎng)度

Hind Ⅲ

    2.5 kb，5.0 kb

Sma I

    2.0 kb，5.5 kb

Hind Ⅲ和Sma I

    2.5 kb，3.0 kb，2.0 kb

可以推知限制酶Hind Ⅲ和Sma I在此DNA分子中分別有            個(gè)識(shí)別序列。兩酶同時(shí)處理后得到的片段，再用限制酶EcoR I處理，結(jié)果導(dǎo)致凝膠上3．0 kb的片段消失，產(chǎn)生一種1.5 kb的新片段；那么如果用限制酶HindⅢ和EcoR I將該線性DNA分子進(jìn)行切割，則可得到長(zhǎng)度分別為           的片段。

 

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科目：高中生物 來(lái)源：2014屆湖南省益陽(yáng)市高二上學(xué)期期末考試?yán)砜粕镌嚲恚ń馕霭妫?/span> 題型：綜合題

降鈣素是一種多肽類激素，臨床上用于治療骨質(zhì)疏松癥等。人的降鈣素活性很低，半衰期較短。某科研機(jī)構(gòu)為了研發(fā)一種活性高、半衰期長(zhǎng)的新型降鈣素，將人工合成的降鈣素DNA與大腸桿菌的DNA分子進(jìn)行重組，并成功的在大腸桿菌中得以表達(dá)。操作大體過(guò)程如下圖1、圖2，據(jù)圖回答下列問(wèn)題：   

（1）圖1示人工合成降鈣素DNA的過(guò)程。從預(yù)期新型降鈣素的功能出發(fā)，推測(cè)相應(yīng)的脫氧核苷酸序列，并人工合成了兩條72個(gè)堿基的DNA單鏈，兩條鏈通過(guò)18個(gè)堿基對(duì)形成部分雙鏈DNA片段，再利用Klenow酶補(bǔ)平，獲得雙鏈DNA。從功能看，Klenow酶是一種___________酶，合成的雙鏈DNA有________個(gè)堿基對(duì)。

（2）圖2將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌最常用的方法是用       處理，使細(xì)胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)。

（3）如果要通過(guò)基因工程獲得轉(zhuǎn)基因動(dòng)物，將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞最常用的方法是             。

（4）以下關(guān)于蛋白質(zhì)工程的說(shuō)法正確的是（  ）

A．蛋白質(zhì)工程以基因工程為基礎(chǔ)          

B．蛋白質(zhì)工程就是酶工程的延伸

C．蛋白質(zhì)工程就是用蛋白酶對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行改造  

D．蛋白質(zhì)工程只能生產(chǎn)天然的蛋白質(zhì)

 

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科目：高中生物 來(lái)源：2010年廣東省高二上學(xué)期期中考試生物試卷 題型：綜合題

（每空2分，共11分）請(qǐng)分析回答基因工程的相關(guān)問(wèn)題：

（1）（3分）基因工程的理論基礎(chǔ)是         法則，可用公式（圖解）表示為        

                              。?

（2）（4分）利用PCR技術(shù)（全稱：                    ）可以擴(kuò)增目的基因，即在試管中進(jìn)行DNA的人工復(fù)制獲得大量DNA克隆分子。某樣品DNA中共含有3000個(gè)堿基對(duì)，堿基數(shù)量滿足：（A+T）：（G+C）=1 ：2，現(xiàn)計(jì)劃通過(guò)PCR得到100個(gè)與樣品相同的DNA，至少需要向試管中加入          個(gè)腺嘌呤脫氧核苷酸。

（3）（4分）為了解基因結(jié)構(gòu)，通常選取一特定長(zhǎng)度的線性DNA分子，先用一種限制酶切割，通過(guò)電泳技術(shù)將單酶水解片段分離，計(jì)算相對(duì)大��；然后再用另一種酶對(duì)單酶水解片段進(jìn)行降解，分析片斷大小。下表是某小組進(jìn)行的相關(guān)實(shí)驗(yàn)。

已知一線性DNA序列共有5000bp（bp為堿基對(duì)）

第一步水解

產(chǎn)物

（單位bp）

第二步水解

產(chǎn)物

（單位bp）

A酶切割

1900

將第一步水解產(chǎn)物分離后，分別用B酶切割

1700  200

1500

800  700

1600

1100 500

 

由實(shí)驗(yàn)可知，在這段已知序列上，A酶與B酶的識(shí)別序列分別為         個(gè)和         個(gè)。

 

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