Question

【題目】通過對枯草芽孢桿菌液體發(fā)酵所產(chǎn)生的蛋白酶活力的研究，從來源不同的10株枯草芽孢桿菌樣品中篩選出1株蛋白酶活力相對較優(yōu)的菌株。請回答下列問題：

（1）篩選枯草芽孢桿菌時，用無菌水將樣品制成溶液并進(jìn)行梯度稀釋，要進(jìn)行梯度稀釋的理由是__________。

（2）篩選高蛋白酶活力的菌株所用的培養(yǎng)基中應(yīng)包括 ___、葡萄糖、蛋白質(zhì)等營養(yǎng)物質(zhì)，生長因子以及___等；該固體培養(yǎng)基中因含有高濃度蛋白質(zhì)而不透明，挑選蛋白酶活力相對較優(yōu)的菌株的依據(jù)是 _________________ 。

（3）若要在-20℃條件下長期保存篩選出的優(yōu)良枯草芽孢桿菌，則菌液中常需要加入一定量的____（填“蒸餾水”“甘油”或“蛋白質(zhì)”）。

（4）蛋白酶的活力可用_________ 來表示。

（5）利用枯草芽孢桿菌進(jìn)行液體發(fā)酵時，常用搖床進(jìn)行振蕩培養(yǎng)，據(jù)此推測枯草芽孢桿菌的細(xì)胞呼吸類型是 ___________________ 。

Answer 1

【答案】樣品制成的溶液中該菌的濃度高，直接培養(yǎng)很難分離得到單個菌落 水、無機鹽 瓊脂 菌落周圍的透明圈較大 甘油 一定條件下，蛋白酶催化蛋白質(zhì)分解反應(yīng)的速率 需氧型（或有氧呼吸）

【解析】

1．培養(yǎng)基的成分：碳源、氮源、水、無機鹽、生長因子等。

2．菌種保存

	臨時保存法	甘油管藏法
適用對象	頻繁使用的菌種	長期保存的菌種
培養(yǎng)及類型	固體斜面培養(yǎng)基	液體培養(yǎng)基
溫度	4℃	-20℃
方法	菌落長成后于冰箱中保存，每3～6個月將菌種從舊的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到新鮮培養(yǎng)基上	將培養(yǎng)的菌液與等體積滅菌后的甘油混合均勻后于冷凍箱內(nèi)保存
缺點	菌種易被污染或產(chǎn)生變異	\\

（1）樣品制成的溶液中該菌的濃度高，直接培養(yǎng)很難分離得到單個菌落，因此需要進(jìn)行梯度稀釋。

（2）微生物的選擇培養(yǎng)基常用固體培養(yǎng)基，因此需要加人凝固劑——瓊脂，培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分應(yīng)包括水、無機鹽、碳源、氮源等，固體培養(yǎng)基中因含有高濃度蛋白質(zhì)而不透明，挑選蛋白酶活力相對較優(yōu)的菌株的依據(jù)課通過菌落周圍的透明圈較大為依據(jù)篩選。

（3）長期保藏菌種常用甘油管藏法，即向培養(yǎng)液中加入一定量的甘油，然后再將混合液放到20℃的冷凍箱中。

（4）酶活力常用一定條件下，蛋白酶催化蛋白質(zhì)分解反應(yīng)的速率來表示。

（5）進(jìn)行液體發(fā)酵時用搖床進(jìn)行振蕩培養(yǎng)，有利于混勻使微生物充分利用營養(yǎng)物質(zhì)，并利于增氧，據(jù)此推測枯草芽孢桿菌的細(xì)胞呼吸類型是需氧型。