Question

【題目】酸奶是以牛奶為原料，經(jīng)過巴氏殺菌后再向牛奶中添加有益菌，經(jīng)發(fā)酵制成的。家庭自制酸奶的安全隱患是有害雜菌的污染問題。為檢測自制酸奶是否被雜菌污染，進(jìn)行如圖所示操作。請回答下列問題：

（1）操作中使用的三角瓶和培養(yǎng)基常用的滅菌方法分別是___________、____________。

（2）制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基時(shí)，操作順序?yàn)橛?jì)算、稱量、________、_______和倒平板。

（3）取最終的牛奶稀釋液0．1mL滴在培養(yǎng)基上進(jìn)行涂布，涂布前要將涂布器__________才能涂布。

（4）在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段時(shí)間后，3個(gè)平板上菌落數(shù)分別為65個(gè)、63個(gè)、64個(gè)，則可以推測酸奶中每毫升含菌數(shù)為_________個(gè)。運(yùn)用這種方法統(tǒng)計(jì)的結(jié)果往往較實(shí)際值偏小，原因是___________________________。

（5）在使用劃線接種法純化乳酸菌的操作中，常使用的接種工具是__________。若培養(yǎng)后獲得的某個(gè)平板，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌落，第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無菌落，其他劃線上有菌落，造成這種現(xiàn)象的操作失誤是_____________________________________。

Answer 1

【答案】干熱滅菌 高壓蒸汽滅菌 溶化 滅菌 灼燒冷卻后 6．4×108 有的菌落可能是由2個(gè)或多個(gè)菌體形成的 接種環(huán) 接種環(huán)灼燒后未冷卻

【解析】

1.配制牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的注意事項(xiàng)①倒平板的溫 度一般50℃左右適宜，溫度過高會(huì)燙手，過低培養(yǎng)基又會(huì)凝固；②平板需倒置，這樣既可使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā)，又可防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。
2.平板劃線操作的注意事項(xiàng)①第一次劃線及每次劃線之前都需要灼燒接種環(huán)滅菌；②灼燒接種環(huán)之后，要冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種；③劃線時(shí)最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連；④劃線用力大小要適當(dāng)，防止用力過大將培養(yǎng)基劃破。

（1）對三角瓶的滅菌方法是干熱滅菌，對培養(yǎng)基的滅菌方法是高壓蒸汽滅菌。
（2）制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基時(shí)，操作順序?yàn)橛?jì)算、稱量、溶化、滅菌和倒平板。
（3）稀釋涂布平板法中，為了防止雜菌的污染，涂布前要將涂布器灼燒冷卻后才能涂布。（4）分析圖解可知，酸奶稀釋了106倍，在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段時(shí)間后，3個(gè)平板上菌落數(shù)分別為65個(gè)、63個(gè)、64個(gè)，則可以推測酸奶中每毫升含菌數(shù)為=（65+63+64）÷3÷0.1×106=6.4×108個(gè)。由于有的菌落可能是由2個(gè)或多個(gè)菌體形成的，因此運(yùn)用這種方法統(tǒng)計(jì)的結(jié)果往往較實(shí)際值偏小。
（5）已知酸奶中的有益菌主要是乳酸菌，進(jìn)一步分離純化乳酸菌的方法是挑取乳酸菌菌落在無菌的條件下繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)，該操作中常使用的接種工具是接種環(huán)。若在劃第二區(qū)域時(shí)，接種環(huán)灼燒后未冷卻。則會(huì)出現(xiàn)第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌落，第二劃線區(qū)域所劃的第一條線上無菌落，其他劃線上有菌落。