Question

【題目】在培育轉(zhuǎn)基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因（kan）常作為標(biāo)記基因，只有含卡那霉素抗性基因的細(xì)胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長。如圖為獲得抗蟲棉的技術(shù)流程。請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題：

（1）A過程需要的酶有________和________________。

（2）要把重組質(zhì)粒導(dǎo)入土壤農(nóng)桿菌，首先必須用________處理土壤農(nóng)桿菌，使土壤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)變?yōu)?/span>________態(tài)；然后將__________________在緩沖液中混合培養(yǎng)完成轉(zhuǎn)化過程。

（3）含有重組質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌侵染離體棉花葉片組織后，將離體棉花葉片組織培養(yǎng)成再生植株要經(jīng)過C____________和E____________。如果要確保再生植株中含有抗蟲基因，可在C過程的培養(yǎng)基中加入___________________。

（4）目的基因能否在棉花植株體內(nèi)維持和表達(dá)其遺傳特性的關(guān)鍵是_______________。

這需要通過檢測才能知道，檢測采用的方法是_____________________。

Answer 1

【答案】（1）限制酶 DNA連接酶

（2）Ca2＋ 感受 重組質(zhì)粒和感受態(tài)細(xì)胞

（3）脫分化 再分化 卡那霉素

（4）目的基因是否插入受體細(xì)胞的DNA分子上 DNA分子雜交技術(shù)

【解析】

試題分析：（1）基因表達(dá)載體構(gòu)建過程中，需要用同種限制酶切割目的基因和載體，使它們產(chǎn)生相同的黏性末端，再用DNA連接酶把這兩個(gè)DNA片段連接起來。（2）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入目的基因時(shí)，首先必須用Ca2＋處理土壤農(nóng)桿菌，使土壤農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)變?yōu)楦惺軕B(tài)；然后將重組質(zhì)粒和感受態(tài)細(xì)胞在緩沖液中混合培養(yǎng)完成轉(zhuǎn)化過程。（3）植物組織培養(yǎng)過程的關(guān)鍵步驟是脫分化和再分化。因?yàn)橹挥泻�卡那霉素抗性基因的�?xì)胞才能在卡那霉素培養(yǎng)基上生長，故若要確保再生植株中含有抗蟲基因，可在C過程的培養(yǎng)基中加入卡那霉素。（4）目的基因能否在棉花植株體內(nèi)維持和表達(dá)其遺傳特性的關(guān)鍵是目的基因是否插入受體細(xì)胞的DNA分子上，檢測采用的方法是DNA分子雜交技術(shù)。