Question

【題目】胡蘿卜素是一種常見的食品添加劑，美國、日本等國通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)培有出一種黃金大米。如用將同時含有酶A、酶B、酶D這二種酶基因的表達載體導人水稱細跑.已知酶A基因來自細菌，酶B基因來自玉米，酶D基因來自其他植物，其中的酶A基因和酶B基因可使水稻胚乳富含β-胡麥卜素而呈現(xiàn)金黃色。請回答下列問題：

（1）酶A、B、D基因遺傳信息不同的原因是___________________________________。

（2）科學家獲取酶A、B、D基因的方法各不相同，酶A基因是通過PCR獲得，該過程中DNA解旋需加熱至_______℃；酶B基因是從cDNA文庫中獲得，cDNA文庫和基因組文庫相比，基因中_______(填“有”或“無”)啟動子，酶D基因作為標記基因，其作用是_________________________。

（3）將含有這三種酶基因的表達載休導人受體細胞可用我國科學家獨創(chuàng)的一種方法，該方法簡便經(jīng)濟，此方法叫______________。

（4）要檢測轉(zhuǎn)基因生物的染色體DNA上星否插入了目的基因，檢測方法采用______________技術(shù)用放射性同位素標記的DNA片段作為__________________，與基因組DNA結(jié)合，若結(jié)果顯示出雜交帶，表明目的基因已插入染色體DNA中。

（5）成功導入上述基因的水稻細胞可通過植物組織培養(yǎng)技術(shù)獲得幼苗，在組織培養(yǎng)實驗中，為什么要強調(diào)相關(guān)材料，器具的滅菌以及無菌操作？___________________________________。

Answer 1

【答案】脫氧核苷酸（堿基）的（數(shù)量）排列順序不同 90～95 無 鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來 花粉管通道法 DNA分子雜交（分子雜交） 探針 雜菌消耗培養(yǎng)基營養(yǎng)物質(zhì)，并產(chǎn)生對培養(yǎng)物有害的物質(zhì)，導致培養(yǎng)物迅速死亡

【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫中獲取、利用PCR技術(shù)擴增和人工合成。（2）基因表達載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達載體包括目的基因、啟動子、終止子和標記基因等。

（3）將目的基因?qū)�入受體細胞：根據(jù)受體細胞不同，導入的方法也不一樣。將目的基因?qū)�入植物細胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入動物細胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物細胞的方法是感受態(tài)細胞法。

（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)；個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）遺傳信息是指，DNA分子中特定的堿基序列。

（2）PCR技術(shù)解旋的溫度為90～95℃；cDNA是通過逆轉(zhuǎn)錄而來，無啟動子和終止子序列；標記基因的作用主要是鑒別受體細胞中是否含有目的基因，從而將含有目的基因的細胞篩選出來。

（3）我國科學家獨創(chuàng)的一種導入方法是花粉管通道法。

（4）檢測目的基因常用DNA分子探針，通過DNA分子雜交技術(shù)，觀察是否出現(xiàn)雜交帶。

（5）植物組織培養(yǎng)過程一定要無菌，否則會因為雜菌污染消耗培養(yǎng)基的營養(yǎng)物質(zhì)或產(chǎn)生有害物質(zhì)，導致培養(yǎng)物死亡。