Question

【題目】水貂病毒性腸炎是由水貂腸炎細(xì)小病毒引起的急性傳染病，具有較高的發(fā)病率和死亡率。某科研小組為生產(chǎn)獸用疫苗，制備水貂細(xì)小病毒空衣殼抗原（MEV-VP2蛋白），設(shè)計如下生產(chǎn)流程（①②③表示技術(shù)環(huán)節(jié)）。

⑴ ①中用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，該過程中所用的模板是_______________________，所用的Taq酶的特點是________________________________。在獲得大量目的基因后，需要使用的工具是_____________________________________________。

⑵ 被重組病毒感染后的蠶細(xì)胞需經(jīng)過②________________________，以達(dá)到增加疫苗產(chǎn)量的目的。在此過程中需要通過控制________通入量，目的是_____________________。

⑶ 為檢測樣液中是否含有有效成分，在③中使用___________________進(jìn)行檢測。

Answer 1

【答案】 (含)控制合成MEV-VP2蛋白的基因（的DNA片段） 高溫下仍保持活性（耐高溫） 限制酶 、DNA連接酶、家蠶桿狀病毒 動物細(xì)胞培養(yǎng) CO2 維持培養(yǎng)液的pH MEV-VP2抗體

【解析】試題分析：本題考查了基因工程、動物細(xì)胞工程及PCR技術(shù)的有關(guān)知識，要求學(xué)生能夠掌握基因工程的工具以及工具酶的作用部位，掌握基因工程的原理和操作步驟，掌握PCR技術(shù)反應(yīng)的原理、條件及動物細(xì)胞培養(yǎng)的過程及條件，再結(jié)合所學(xué)知識準(zhǔn)確答題。

（1）PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時所用的模板是含有目的基因的DNA片段，由題干可知，該實驗需制備MEVVP2蛋白，因此模板為含有MEVVP2蛋白基因的DNA片段。所用的Taq酶的特點是高溫下仍保持活性（耐高溫）。在獲得目的基因后，需要使用的工具是限制酶、DNA連接酶、家蠶桿狀病毒，需要用限制酶與連接酶將目的基因重組到家蠶桿狀病毒DNA上。

（2）被重組病毒感染后的蠶細(xì)胞需經(jīng)過②動物細(xì)胞培養(yǎng)大量增殖，從而得到大量的MEVVP2蛋白，增加疫苗產(chǎn)量。在此過程中為了維持培養(yǎng)液的pH，需控制CO2的通入量。

（3）為檢測樣液中是否含有有效成分MEVVP2蛋白，可使用MEVVP2蛋白的抗體進(jìn)行抗原—抗體雜交，從而檢測樣液中是否存在有效成分。