Question

【題目】急性腸胃炎是由細(xì)菌通過消化道進(jìn)入人體導(dǎo)致的。因此檢驗(yàn)飲用水的細(xì)菌含量是有效監(jiān)控疾病發(fā)生的必要措施，請回答下列與檢驗(yàn)飲用水有關(guān)的問題：

（1）配制牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的基本步驟：計(jì)算→稱量→溶化→滅菌→__________。

（2）檢驗(yàn)大腸桿菌的含量時(shí)，通常將水樣進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，記錄菌落數(shù)量，這種接種方法稱為____________。

（3）用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)是否需要設(shè)置對照組__________，為什么?__________。

（4）如分別取 0．1 mL 已稀釋 102 倍的水樣分別涂布到三個(gè)瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)基記錄到大腸桿菌的菌落數(shù)分別為 52、 55 、 58 ，則每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為__________。 與用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法相比，此計(jì)數(shù)方法測得的細(xì)菌數(shù)目較__________（填“多”或“少”）。

（5）已知大腸桿菌能發(fā)酵乳糖并產(chǎn)酸產(chǎn)氣，現(xiàn)提供足量的已滅菌的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液和具塞試管，應(yīng)如何判斷待檢水樣中是否含有大腸桿菌？請寫出大致的實(shí)驗(yàn)思路。

_____________________________。

Answer 1

【答案】倒平板 稀釋涂布平板法 需要 因?yàn)樾枰�判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染（培養(yǎng)基滅菌是否合格） 5．5×107 少 通過無菌操作向試管內(nèi)注入一定量待檢水樣，再注入已滅菌的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液將試管充滿，塞上塞子，混勻后置于37℃恒溫箱培養(yǎng)24h。若試管內(nèi)有氣泡生成，則說明水樣中有大腸桿菌 (也可以用PH試紙檢測PH變化）。

【解析】

對目的微生物篩選時(shí)，稀釋涂布平板法適用于對微生物的計(jì)數(shù)，用該方法進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)需要做對照試驗(yàn)以排除培養(yǎng)基污染造成的誤差。

（1）配制瓊脂培養(yǎng)基的基本步驟：計(jì)算→稱量→溶化→滅菌→倒平板。

（2）檢驗(yàn)大腸桿菌的含量時(shí)，通常將水樣進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，記錄菌落數(shù)量，這種接種方法稱為稀釋涂布平板法。

（3）用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)需要設(shè)置對照組，因?yàn)樾枰�判斷培養(yǎng)基是否被雜菌污染（培養(yǎng)基滅菌是否合格）。

（4）每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為：（52+55+58）÷3×10000×102=5.4×107個(gè)；與用顯微鏡直接計(jì)數(shù)法相比，此計(jì)數(shù)方法測得的細(xì)菌數(shù)目較少。

（5）檢測水樣中是否含有大腸桿菌的方法是：通過無菌操作向試管內(nèi)注入一定量待測水樣；再注入已滅菌的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液將試管充滿，塞上塞子，混勻后置于37℃恒溫箱培養(yǎng)24h。若試管內(nèi)有氣泡生成，則說明水樣中有大腸桿菌（也可以用PH試紙檢測PH變化）。