Question

【題目】Ⅰ.如圖：若以甲肝病毒表面抗原的基因為目的基因，以農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒為載體構(gòu)建基因表達(dá)載體，請分析回答：切割質(zhì)粒時，應(yīng)使用限制酶___________；成功建構(gòu)的重組質(zhì)粒上含有_______個限制酶C的識別位點。甲肝病毒表面抗原基因插入受體細(xì)胞的染色體DNA上是否表達(dá)，通常采用_________的方法進(jìn)行檢測。

Ⅱ.單克隆抗體相對傳統(tǒng)方法制備的抗體，其優(yōu)點有_______________；

相對化療，用“生物導(dǎo)彈”治療癌癥的優(yōu)點是___________________。

相對雜交育種，植物體細(xì)胞雜交技術(shù)在育種上的優(yōu)點是___________。

Ⅲ.下列有關(guān)胚胎工程的示意圖，分析回答：圖中的早期胚胎通常處于____________階段。在形態(tài)上，ES細(xì)胞具有體積小、_________的特點。

Answer 1

【答案】酶A和酶B2抗原-抗體雜交特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備療效高、毒副作用小克服遠(yuǎn)緣雜交不親和障礙桑椹胚或囊胚細(xì)胞核大、核仁明顯

【解析】

限制性內(nèi)切酶能識別DNA分子上特定的序列和切點并進(jìn)行切割，限制性內(nèi)切酶具有專一性，即一種限制性內(nèi)切酶只能識別一種特定的核苷酸序列。被限制內(nèi)切酶切開的DNA兩條單鏈切口，各含有幾個伸出的、可互補(bǔ)配對的核苷酸，這種切口就是黏性末端。黏性末端之間，只要切口處伸出的核苷酸間存在互補(bǔ)關(guān)系，就能在DNA連接酶的作用下連接起來。單克隆抗體是由單一B細(xì)胞克隆產(chǎn)生的高度均一、僅針對某一特定抗原表位的抗體，通常采用雜交瘤技術(shù)來制備。胚胎工程是指對動物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù)。包括體外受精、胚胎移植、胚胎分割移植、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)。

I．分析三種酶的識別序列和切割位點以及目的基因兩側(cè)的堿基序列可知，在目的基因的上游具有酶B的識別序列，下游有酶C的識別序列，即獲取目的基因時，應(yīng)使用限制酶B和酶C；而目的基因應(yīng)插入到質(zhì)粒的T-DNA中，因此切割質(zhì)粒時，應(yīng)使用限制酶A和酶B；質(zhì)粒上原本就有一個酶C的識別位點，而目的基因的酶C切割的黏性末端和質(zhì)粒的酶A切割的黏性末端連接后，形成的序列也能夠被酶C識別，因此成功建構(gòu)的重組質(zhì)粒上含有2個限制酶C的識別位點。甲肝病毒表面抗原基因插入受體細(xì)胞的染色體DNA上是否表達(dá)，通常采用抗原-抗體雜交的方法進(jìn)行檢測。

II．傳統(tǒng)方法產(chǎn)生的抗體種類繁多（盡管是單一抗原刺激），所以想要提取所需單一抗體極為困難，而單克隆抗體是由單一雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生，與傳統(tǒng)方法制備的抗體相比其優(yōu)點是特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備。生物導(dǎo)彈的概念是細(xì)胞靶向治療，相對化療其優(yōu)點是療效高、毒副作用小。植物體細(xì)胞雜交可以將不同種的植物細(xì)胞融合成一個細(xì)胞，再利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將細(xì)胞培育成植株的過程，所以該方法打破了生殖隔離，克服了不同物種間遠(yuǎn)源雜交不親和的障礙。

Ⅲ. 胚胎發(fā)育通常是指從受精卵起到胚胎出離卵膜的一段過程，卵細(xì)胞受精以后即開始分裂、分化，形成胚泡，先形成的細(xì)胞團(tuán)為桑椹胚，然后形成囊胚，最后形成原腸胚，圖中的早期胚胎通常處于桑椹胚或囊胚階段。ES細(xì)胞也稱胚胎干細(xì)胞：胚胎干細(xì)胞是早期胚胎（原腸胚期之前）或原始性腺中分離出來的一類細(xì)胞。ES細(xì)胞具有與早期胚胎細(xì)胞相似的形態(tài)結(jié)構(gòu)，在形態(tài)上，具有體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯的特點。