【題目】科研人員利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將抗病毒蛋白基因C導(dǎo)入番木瓜,培育出轉(zhuǎn)基因抗病番木瓜,Ti質(zhì)粒如圖所示。下列敘述,正確的是( )
A.農(nóng)桿菌的擬核DNA與番木瓜基因發(fā)生重組
B.構(gòu)建重組質(zhì)粒需要限制酶和DNA聚合酶
C.含重組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌具有四環(huán)素抗性
D.轉(zhuǎn)基因抗病番木瓜不具有卡那霉素抗性
【答案】D
【解析】
農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法:農(nóng)桿菌是一種在土壤中生活的微生物,能在自然條件下感染雙子葉植物和裸子植物,而對大多數(shù)單子葉植物沒有感染能力。當(dāng)植物體受到損傷時,傷口處的細胞會分泌大量的酚類化合物,吸引農(nóng)桿菌移向這些細胞,這時農(nóng)桿菌中的 Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細胞,并且整合到受體細胞染色體的DNA上。根據(jù)農(nóng)桿菌的這種特點,如果將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA上,通過農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用,就可以使目的基因進人植物細胞,并將其插入到植物細胞中染色體的DNA上,使目的基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達。
A、農(nóng)桿菌的擬核DNA不會與番木瓜基因發(fā)生重組,和番木瓜基因發(fā)生重組的是其質(zhì)粒上的基因,A錯誤;
B、構(gòu)建重組質(zhì)粒需要限制酶和DNA連接酶,B錯誤;
C、含重組Ti質(zhì)粒的農(nóng)桿菌具有卡那霉素抗性,而不具有四環(huán)素抗性,C錯誤;
D、因為轉(zhuǎn)入番木瓜的是重組Ti質(zhì)粒的T-DNA,其中不含卡那霉素抗性基因,因此轉(zhuǎn)基因抗病番木瓜不含有卡那霉素抗性基因,故不具有卡那霉素抗性,D正確。
故選D。
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【題目】下面是果酒和果醋制作的實驗流程和某同學(xué)設(shè)計的果酒和果醋的發(fā)酵裝置。下列相關(guān)敘述中,正確的是( )
A.沖洗葡萄時不能次數(shù)過多,否則果酒的制作會失敗
B.利用葡萄制作果醋時,必須按照圖1所示先進行酒精發(fā)酵然后再進行果醋發(fā)酵
C.圖2中的裝置中排氣口彎曲可防止發(fā)酵液被空氣中的雜菌污染
D.制作果酒要關(guān)閉充氣口、打開排氣口,制作果醋時充氣口和排氣口都要打開
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【題目】(一)正常細胞不能合成干擾素,但含有干擾素基因。我國科學(xué)家釆用基因工程技術(shù)生產(chǎn)干擾素a-2b已實現(xiàn)量產(chǎn)。具體做法是將產(chǎn)生干擾素的人白細胞的mRNA分離,反轉(zhuǎn)錄得到干擾素基因。將含有四環(huán)素、氨芐青霉素抗性基因的質(zhì)粒PBR322和干擾素基因進行雙酶切,用連接酶連接。將重組載體DNA分子在一定條件下導(dǎo)入大腸桿菌,在培養(yǎng)基中篩選培養(yǎng),檢測干擾素的表達量,選出高效表達的工程菌。請回答:
(1)在分化誘導(dǎo)因子作用下,正常細胞可以擺脫抑制、合成干擾素,該過程發(fā)生的實質(zhì)是___________。
(2)據(jù)下圖分析,構(gòu)建重組載體DNA分子時,可以選用________________________兩種限制酶對質(zhì)粒pBR322和干擾素基因進行雙酶切,目的是既能保證目的基因和質(zhì)粒正向連接,又能防止_________________________ 、_____________________________(答兩點)。
(3)將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌中,然后將細菌涂布到含___________的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng),就可得到含質(zhì)粒PBR322或重組質(zhì)粒的細菌單菌落;再從每一個單菌落中挑取部分細菌轉(zhuǎn)涂到含有___________的培養(yǎng)基上,不能生長的絕大部分是含有重組質(zhì)粒的細菌,原因是___________。
(4)干擾素在體外保存非常困難,如果將其分子中的一個半胱氨酸變成絲氨酸,在-70°C 條件下可以保存半年。實現(xiàn)這一轉(zhuǎn)變需要直接對___________進行修飾或改造,這屬于蛋白質(zhì)工程的范疇。
(二)科學(xué)家設(shè)計了以下流程,利用胚胎干細胞(ES細胞)對干擾素基因缺失的患者進行基因治療。請回答:
(1)上圖中進行的是________(填“體內(nèi)”或“體外”)基因治療,①過程中利用的生物工程技術(shù)手段稱為________。若導(dǎo)入的干擾素基因序列為已知,則可通過________獲取。
(2)ES細胞是由囊胚中的____________分離出來的一類細胞,具有____________性,可以將其培養(yǎng)成人體各種組織器官。
(3)下列關(guān)于上述操作中的敘述,正確的是________。
A.①②操作體現(xiàn)了上皮細胞具有全能性
B.③過程可以用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法進行基因?qū)?/span>
C.完成基因?qū)氲募毎途哂辛撕铣刹⒎置诟蓴_素的能力
D.基因治療依據(jù)的變異原理是基因重組
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【題目】以廣東科學(xué)家領(lǐng)銜的國際研究團隊歷時四年,利用基因編輯技術(shù)(CRISPR/Cas9)和體細胞核移植技術(shù),成功地將亨廷頓舞蹈病基因(HTT基因)導(dǎo)入豬的受精卵中,從而培育出首例患亨廷頓舞蹈病轉(zhuǎn)基因的豬,精準(zhǔn)地模擬出人類神經(jīng)退行性疾病,標(biāo)志我國大動物模型研究走在了世界前列。具體操作過程如圖。
(1)利用基因編輯技術(shù),將人突變的HTT基因插入到豬的內(nèi)源性HTT基因的表達框中,可能用到的基因工程工具酶有___________。目的基因能否在成纖維細胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是_______________________。
(2)欲獲取單個的成纖維細胞,需用________ 酶處理豬的相應(yīng)組織,放置于混合氣體培養(yǎng)箱中培養(yǎng),其中CO2的主要作用是___________________。過程①得到去核卵細胞普遍采用__________的方法。
(3)為獲得更多的患亨廷頓舞蹈病豬,可在胚胎移植前對胚胎進行__________,若操作對象是囊胚階段的胚胎,要注意______________________。
(4)比起果蠅、線蟲、小鼠,豬作為人類疾病模型的優(yōu)勢有______________。
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【題目】下列關(guān)于細胞工程操作流程的表述,不正確的是( )
A.動物組織細胞懸液→原代培養(yǎng)傳代培養(yǎng)
B.高產(chǎn)奶牛體細胞去核的牛卵母細胞重組細胞
C.B淋巴細胞和瘤細胞融合細胞單克隆抗體
D.胡蘿卜根切斷切成1cm2小塊愈傷組織植株
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【題目】如圖為制備單克隆抗體的過程,下列有關(guān)敘述不正確的是( )
A.上述過程應(yīng)用了細胞工程中的動物細胞融合、動物細胞培養(yǎng)兩大技術(shù)
B.用特定的抗原多次注射免疫小鼠主要目的是刺激小鼠機體產(chǎn)生更多的抗體
C.A步驟需要用特定的選擇培養(yǎng)基對多種類型的細胞進行初次篩選
D.用單克隆抗體制成攜帶抗癌藥物的“生物導(dǎo)彈”具有特異性強、毒副作用小特點
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【題目】海藻糖是由兩個葡萄糖(G)結(jié)合而成的非還原性二糖,其結(jié)構(gòu)穩(wěn)定、耐高溫,能幫助酵母菌克服極端環(huán)境。在無壓力狀態(tài)下,葡萄糖的代謝產(chǎn)物G6P和UDPG可抑制海藻糖合成酶基因(TPS復(fù)合體)的表達,胞內(nèi)海藻糖水解酶(Nthl)水解已經(jīng)存在的海藻糖,分解膜外海藻糖的水解酶(Ath1)處于小液泡中(如圖所示)。在有壓力狀態(tài)下,TPS復(fù)合體微話,Nth1失活,轉(zhuǎn)運蛋白(Agt1)將細胞內(nèi)海藻糖運至膜外,結(jié)合在磷脂上形成隔離保護,酵母菌進入休眠狀態(tài)以度過惡劣的環(huán)境;卮鹣铝邢嚓P(guān)問題:
無壓力狀態(tài)下酵母海藻糖代謝圖
(1)與大腸桿菌細胞相比,酵母菌細胞最主要的結(jié)構(gòu)特征是________________。在無壓力狀態(tài)下下,細胞內(nèi)海藻糖含量低的原因有_____________________________________________。
(2)在有壓力狀態(tài)下,TPS復(fù)合體激活,胞內(nèi)產(chǎn)生大量海藻糖,此時磨碎酵母菌制成溶液,加入斐林試劑,在水浴加熱條件下,_________________(填“出現(xiàn)”或“不出現(xiàn)”)磚紅色沉淀,原因是______________________________。
(3)發(fā)面時所用的干酵母因海藻糖的保護而表現(xiàn)為代謝_______________,對其活化的過程中,酵母菌內(nèi)的變化有_______________、_______________,由于海藻糖被分解為葡萄糖,葡萄糖的代謝產(chǎn)物G6P和UDPG抑制TPS復(fù)合體基因的活性,在這種調(diào)節(jié)機制下,酵母菌迅速活化,從而適應(yīng)環(huán)境。
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【題目】為探究物質(zhì)a對淀粉酶活性的影響,研究者向A、B兩只試管中分別加入了等量的淀粉和淀粉酶溶液,當(dāng)反應(yīng)進行到t1時,A組實驗加入物質(zhì)a,兩組實驗繼續(xù)在最適條件下進行反應(yīng)直到終止,結(jié)果如圖所示,下列分析錯誤的是
A.適當(dāng)改變反應(yīng)溫度或pH值t2將右移
B.t1時刻適當(dāng)增加底物后B組反應(yīng)速率將加快
C.物質(zhì)a可能與淀粉酶結(jié)合改變了酶的空間結(jié)構(gòu)
D.物質(zhì)a對酶活性的影響可通過提高底物濃度來緩解
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【題目】如圖①、②、③、④表示的是四株豌豆體細胞中的兩對基因及其在染色體上的位置,下列分析錯誤的是( )
A. ①、②雜交后代的性狀分離之比是9:3:3:1
B. ①、③雜交后代的基因型之比是1:1:1:1
C. 四株豌豆自交都能產(chǎn)生基因型為AAbb的后代
D. ①株中基因A與a的分開發(fā)生在減數(shù)第二次分裂時期
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