Question

【題目】下圖是培育表達(dá)人乳鐵蛋白的乳腺生物反應(yīng)器的技術(shù)路線。圖中tetR表示四環(huán)素抗性基因，AmpR表示氨芐青霉素抗性基因，BAmHI、HinDIII、SmA I直線所示為三種限制酶的酶切位點。據(jù)圖回答：

（1）圖中將人乳鐵蛋白基因插入載體，需用__________限制酶同時酶切載體和人乳鐵蛋白基因。篩選含有重組載體的大腸桿菌首先需要在含____________的培養(yǎng)基上進(jìn)行。能驅(qū)動人乳鐵蛋白基因在乳腺細(xì)胞中特異性表達(dá)的調(diào)控因子是圖中的____________。過程①采用的操作方法通常是_____________。

（2）過程②代表的生物技術(shù)是_____________。對早期胚胎進(jìn)行切割，經(jīng)過程②可獲得多個新個體。目前最常見的是經(jīng)分割產(chǎn)生的同卵______胎。

（3）為檢測人乳鐵蛋白是否成功表達(dá)，可采用____________技術(shù)。

（4）對代孕牛的要求是_________________。

Answer 1

【答案】（1）HinDⅢ和BAmHⅠ 氨芐青霉素 啟動子 顯微注射

（2）胚胎移植 雙

（3）抗原—抗體雜交

（4）有健康體質(zhì)和正常繁殖能力

【解析】（1）限制酶能同時切割目的基因和運載體，由圖分析可知應(yīng)用HinDⅢ和BAmHⅠ進(jìn)行切割。由題意可知含有抗氨芐青霉素抗性，所以應(yīng)先在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進(jìn)行初步選擇。驅(qū)動基因進(jìn)行表達(dá)的是啟動子，它是RNA聚合酶識別和結(jié)合的位點，驅(qū)動基因的表達(dá)。要將重組載體導(dǎo)入到動物細(xì)胞中應(yīng)用顯微注射法。

（2）過程②是將早期胚胎移入到代孕母牛體內(nèi)的胚胎移植技術(shù)。胚胎分割中目前最常見的是分割產(chǎn)生的同卵雙胞胎。

（3）要檢測目的基因是否表達(dá)成功，應(yīng)用抗原-抗體雜交。

（4）對代孕母畜應(yīng)要求具有有健康體質(zhì)和正常繁殖能力。