Question

【題目】科研人員發(fā)現(xiàn)在黃石公園的溫泉中生活著一種水生嗜熱菌，并進(jìn)行了一系列研究：

（1）由于溫泉中菌的濃度很低，所以需要首先將菌進(jìn)行“富集”，應(yīng)該在_____（全營(yíng)養(yǎng)／MS／以尿素為唯一氮源）的_____（液體／固體）培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。

（2）當(dāng)菌“富集”起來后，需要對(duì)菌種進(jìn)行分離，得到_____，通常用劃線分離法或稀釋涂布分離法來實(shí)現(xiàn)此目的。

（3）得到純化的菌株后，科研人員首先對(duì)其進(jìn)行了初步鑒定：首先從平板上菌落的_____等特征來觀察菌落，并在_____下觀察細(xì)菌的形態(tài)（例如：棒狀、桿狀或是球型等）。

（4）科研人員為了找出水生嗜熱菌最適的培養(yǎng)溫度，做了相關(guān)實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)的主要步驟依次是_______________等。

a 配置培養(yǎng)基

b對(duì)相應(yīng)培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌

c對(duì)相應(yīng)培養(yǎng)基進(jìn)行灼燒滅菌

d 對(duì)相應(yīng)培養(yǎng)基進(jìn)行干熱滅菌

e調(diào)節(jié)培養(yǎng)基至適宜的pH值

f 將培養(yǎng)基分裝至各三角瓶

g在每瓶培養(yǎng)基中分別接種相同量的純化后的菌種

h每三瓶為一組，分別放置10、20、30、40、50℃下進(jìn)行培養(yǎng)

i每三瓶為一組，分別放置在50、60、70、80、90℃下進(jìn)行培養(yǎng)

j測(cè)量每瓶培養(yǎng)基中細(xì)菌在一天后的菌體濃度，并對(duì)每個(gè)溫度的三組取均值

k測(cè)量每瓶培養(yǎng)基中細(xì)菌在十天后的菌體濃度，并記錄每個(gè)溫度下的最高值

（5）科研人員還鑒定了該菌在不同抗生素下的生長(zhǎng)情況，該實(shí)驗(yàn)結(jié)果在培養(yǎng)該菌時(shí)的應(yīng)用價(jià)值是_________。

（6）科研人員在此菌種發(fā)現(xiàn)一種耐高溫的_____酶，此酶可用于 PCR 實(shí)驗(yàn)。

Answer 1

【答案】全營(yíng)養(yǎng) 液體 單菌落 大小/顏色 光學(xué)顯微鏡 aefbgij 在培養(yǎng)該菌時(shí)，可以施加相應(yīng)的抗生素，防止雜菌污染 DNA 聚合酶

【解析】

1、培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源、無機(jī)鹽，此外還要滿足微生物生長(zhǎng)對(duì)pH、特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)霉菌時(shí)需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需將pH調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧微生物時(shí)則需要提供無氧的條件。

2、微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長(zhǎng)，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個(gè)菌落。②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個(gè)菌落。

（1）由于溫泉中菌的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)包括碳源、氮源、水和無機(jī)鹽，而其又沒有固氮能力，因此從溫泉中富集菌種，應(yīng)該在全營(yíng)養(yǎng)的液體培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。

（2）當(dāng)菌“富集”起來后，常用平板劃線法或稀釋涂布平板法對(duì)菌種進(jìn)行分離，獲得單菌落。

（3）得到純化的菌株后，需要對(duì)其進(jìn)行初步鑒定：先從平板上菌落的大小、顏色等特征來觀察菌落，再在顯微鏡下觀察細(xì)菌的形態(tài)。

（4）科研人員為了找出水生嗜熱菌最適的培養(yǎng)溫度，做了相關(guān)實(shí)驗(yàn)，則實(shí)驗(yàn)的自變量是溫度，且溫度應(yīng)該取較高值，根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的基本原則和基本思路可知，實(shí)驗(yàn)的主要步驟為：

a配置培養(yǎng)基→e調(diào)節(jié)培養(yǎng)基至適宜的pH值→f將培養(yǎng)基分裝至各三角瓶→b對(duì)相應(yīng)培養(yǎng)基進(jìn)行高壓蒸汽滅菌→g在每瓶培養(yǎng)基中分別接種相同量的純化后的菌種→i每三瓶為一組，分別放置在50、60、70、80、90℃下進(jìn)行培養(yǎng)→j測(cè)量每瓶培養(yǎng)基中細(xì)菌在一天后的菌體濃度，并對(duì)每個(gè)溫度的三組取均值。

（5）科研人員還鑒定了該菌在不同抗生素下的生長(zhǎng)情況，根據(jù)此結(jié)果，在培養(yǎng)該菌時(shí)，可以施加相應(yīng)的抗生素，以防止雜菌污染。

（6）科研人員在此菌種發(fā)現(xiàn)一種耐高溫的酶，且此酶可用于 PCR 實(shí)驗(yàn)，說明此酶為耐高溫的DNA 聚合酶。