Question

【題目】請(qǐng)回答基因工程相關(guān)問(wèn)題：

（1）基因工程的四個(gè)基本操作步驟：獲取目的基因、_______、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、目的基因檢測(cè)與鑒定；獲取目的基因的兩條途徑為______和_______。

（2）在基因表達(dá)載體中，啟動(dòng)子是_______聚合酶識(shí)別和結(jié)合的部位。若將真核基因在原核細(xì)胞中表達(dá)，對(duì)該目的基因的基本要求是________；在獲得轉(zhuǎn)基因奶牛時(shí)，將基因表達(dá)載體導(dǎo)入受體細(xì)胞所采用的方法是________。

（3）假設(shè)以大腸桿菌質(zhì)粒作為運(yùn)載體，并以同一種限制性?xún)?nèi)切酶切割運(yùn)載體與目的基因?qū)⑶懈詈蟮倪\(yùn)載體與目的基因片段混合，并加入DNA連接酶。連接產(chǎn)物至少有__________種環(huán)狀DNA分子，它們分別是____________。

Answer 1

【答案】基因表達(dá)載體的構(gòu)建 從生物材料中分離 人工合成 RNA 除去內(nèi)含子 顯微注射法 3 運(yùn)載體自連、目的基因片段自連、運(yùn)載體與目的基因片段相連的環(huán)狀DNA分子

【解析】

該題主要考察了基因工程的基本過(guò)程，基因工程包含四個(gè)步驟，分別是獲取目的基因、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、目的基因檢測(cè)與鑒定。真核細(xì)胞中的基因和原核細(xì)胞中的基因差別在內(nèi)含子的表達(dá)上，啟動(dòng)子是進(jìn)行轉(zhuǎn)錄開(kāi)始的起點(diǎn)。

（1）基因工程的四步基本操作為獲取目的基因、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞、目的基因檢測(cè)與鑒定；獲取目的基因的兩個(gè)方法分別為從目標(biāo)生物體內(nèi)獲取，或人工合成；

（2）啟動(dòng)子是轉(zhuǎn)錄開(kāi)始的信號(hào)位點(diǎn)，因此是RNA聚合酶的結(jié)合位點(diǎn)；由于原核細(xì)胞中缺少對(duì)內(nèi)含子轉(zhuǎn)錄出的片段進(jìn)行修飾的能力，所以需要在基因中去除內(nèi)含子；動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行基因表達(dá)載體的導(dǎo)入時(shí)，常常選擇顯微注射法；

（3）同一種限制酶切割基因片段后得到的黏性末端相同，所以加入DNA連接酶后，相同的黏性末端都有可能連接到一起，因此可能產(chǎn)生三種連接情況，分別為運(yùn)載體自連、目的基因片段自連、運(yùn)載體與目的基因片段相連的環(huán)狀DNA分子。