Question

【題目】牛奶是微生物生長的良好培養(yǎng)基。牛奶在飲用前都要經(jīng)過巴氏消毒，以殺死有害微生物。為檢測自制酸奶是否被雜菌污染，進行如圖所示操作。請回答下列問題。

（1）牛奶用巴氏消毒的好處是_____________。

（2）圖中所用培養(yǎng)基在滅菌過程中，需用到高壓蒸汽滅菌鍋。下面是關于高壓蒸汽滅菌鍋使用過程中的操作，正確的先后順序是①②_____________④⑧⑨。（有的操作可以重復）

①裝入待滅菌物品②加蓋③加熱滅菌鍋④打開排氣閥⑤關閉排氣閥⑥切斷電源⑦壓力表的壓力降到零⑧打開蓋子⑨取出滅菌物品

（3）取最終的牛奶稀釋液0．1mL滴在培養(yǎng)基上進行涂布，應選擇的工具是下圖中_____________。

（4）圖中所示方法為稀釋涂布培養(yǎng)法，理想情況下，培養(yǎng)一段時間后可在培養(yǎng)基表面形成菌落。若用該方法培養(yǎng)設置了3個培養(yǎng)皿，菌落數(shù)分別為65個、63個、64個，則可以推測酸奶中每毫升含細菌數(shù)為_____________個，運用這種方法統(tǒng)計的結果往往較實際值_____________（偏大/偏�。�，如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)_____________的菌落，說明自制酸奶已被雜菌污染。

（5）已知酸奶中的有益菌主要是乳酸菌，要進一步分離純化乳酸菌采用下圖所示的劃線分離操作，正確的是_____________，其正確操作過程中，劃線工具至少要灼燒_____________次。

Answer 1

【答案】牛奶的營養(yǎng)成分不被破壞 ③④⑤⑥⑦④⑧ B 6.4×108 偏小 （形狀、大小、顏色、光澤度）不同 B 5

【解析】

滅菌是指使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所用的微生物（包括芽孢和孢子），常用的方法主要有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌，適用對象主要有接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等。消毒是指使用較為溫和的物理或化學方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包芽孢和孢子），常用的方法主要有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學藥劑消毒法、紫外線消毒法，適用對象主要有操作空間、某些液體、雙手等。

分析題圖：圖1表示的是稀釋涂布平板法，可以用來分離菌種和對菌種進行計數(shù)；圖2中A為接種環(huán)，B為涂布器，C為滴管，D為接種針。

（1）巴氏消毒的方法是指70-75℃煮30分鐘或80℃煮15分鐘，使用這種方法對生鮮牛奶進行消毒的好處是牛奶的營養(yǎng)成分不被破壞。

（2）高壓蒸汽鍋滅菌的操作步驟：①裝入待滅菌物品，②加蓋，③加熱滅菌鍋，④打開排氣閥，⑤關閉排氣閥，⑥切斷電源，⑦壓力表的壓力降到零，④打開排氣氣閥，⑧打開蓋子，⑨取出滅菌物品。

（3）將液體菌種滴在培養(yǎng)基上進行涂布的方法是稀釋涂布平板法，所用的接種工具是涂布器，即圖中的B。

（4）據(jù)圖分析，圖中10mL酸奶稀釋了106倍，最后取了10mL稀釋液中的0.1mL，且3個培養(yǎng)皿中菌落數(shù)分別為65個、63個、64個，因此酸奶中每毫升含細菌數(shù)為( 65+63+64 ) ÷3÷0.1×106=6.4×108個。由于經(jīng)此方法接種培養(yǎng)時，當兩個或多個菌落重疊在一起時按一個菌落計算，所以運用這種方法統(tǒng)計的結果往往較實際值偏小。如果培養(yǎng)基上出現(xiàn)（形狀、大小、顏色、光澤度）不同的菌落，說明自制酸奶已被雜菌污染。

（5）要進一步分離純化乳酸菌采用平板劃線法進行操作，圖中所示的平板劃線分離的操作正確的是B圖；接種環(huán)在每次接種前和接種結束后都要通過灼燒來滅菌，即圖B中的4次劃線操作前都要灼燒滅菌，接種結束后還需灼燒滅菌1次，以防止造成污染，因此完成圖B劃線共需灼燒接種環(huán)5次。