Question

【題目】人乳頭瘤病毒（HPV）感染引起人體內(nèi)抗癌基因Rb和p53失活可引發(fā)宮頸癌。研究發(fā)現(xiàn)硼替佐米（BTZ）和順鉑（CIS）對(duì)治療宮頸癌均有效果，且聯(lián)合使用效果更佳。為驗(yàn)證硼替佐米（BTZ）聯(lián)合順鉑（CIS）對(duì)宮頸癌細(xì)胞增殖的影響，請(qǐng)根據(jù)以下提供的實(shí)驗(yàn)材料，完善實(shí)驗(yàn)思路，并預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

（要求與說(shuō)明：BTZ引起的Hela細(xì)胞凋亡與抑癌蛋白Rb有關(guān)，CIS引起的Hela細(xì)胞凋亡與p53蛋白有關(guān)，試劑使用的劑量不作要求）

材料與用具：培養(yǎng)瓶若干個(gè)、Hela細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)液、適宜濃度BTZ溶液、適宜濃度CIS溶液、流式細(xì)胞儀等。

（1）完善實(shí)驗(yàn)思路：

①取培養(yǎng)瓶若干，將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的Hela細(xì)胞隨機(jī)均分為若干組，分別置于若干個(gè)培養(yǎng)瓶中并加入等量的培養(yǎng)液。

②分組如下：____________________________________________________________________。

③將培養(yǎng)瓶放入CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時(shí)后，分別取樣檢測(cè)相關(guān)蛋白含量，并用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡數(shù)量。

④____________________________________。

（2）預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

_____________________

（3）分析討論：

①HPV是一種雙鏈環(huán)狀DNA病毒，其遺傳物質(zhì)中堿基含量符合_____________法則；HPV誘發(fā)細(xì)胞癌變屬于____________因素。P53基因的作用是_______________（促進(jìn)/抑制）正常細(xì)胞的分裂。

②為了使培養(yǎng)的細(xì)胞分裂周期同步化，在細(xì)胞處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的培養(yǎng)液中添加DNA合成抑制劑，處于______________期的細(xì)胞不受影響而繼續(xù)細(xì)胞周期的運(yùn)轉(zhuǎn)，最終細(xì)胞停滯在細(xì)胞周期的_______________________，再通過(guò)一定的方法達(dá)到細(xì)胞周期同步化。

Answer 1

【答案】甲組：不作處理；

乙組：加入適量且等量的適宜濃度的BTZ溶液；

丙組：加入適量且等量的適宜濃度的CIS溶液；

丁組：加入適量且等量的適宜濃度的BTZ溶液、CIS溶液。 統(tǒng)計(jì)、處理和分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù) 卡伽夫 生物 促進(jìn) G1、G2、M G1期和S期的交界處

【解析】

1、對(duì)于實(shí)驗(yàn)題，我們?cè)诮獯鸬臅r(shí)候首先要理順解題思路，弄清實(shí)驗(yàn)的原理、實(shí)驗(yàn)的方法，以及實(shí)驗(yàn)中的自變量、因變量和無(wú)關(guān)變量。把握住設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)遵循的科學(xué)性原則、對(duì)照原則和無(wú)關(guān)變量等量的原則進(jìn)行綜合分析和解答。

2、有絲分裂不同時(shí)期的特點(diǎn)：

（1）間期：進(jìn)行DNA的復(fù)制和有關(guān)蛋白質(zhì)的合成；
（2）前期：核膜、核仁逐漸解體消失，出現(xiàn)紡錘體和染色體；
（3）中期：染色體形態(tài)固定、數(shù)目清晰；
（4）后期：著絲點(diǎn)分裂，姐妹染色單體分開(kāi)成為染色體，并均勻地移向兩極；
（5）末期：核膜、核仁重建、紡錘體和染色體消失

（1）本實(shí)驗(yàn)的目的是：驗(yàn)證硼替佐米（BTZ）聯(lián)合順鉑（CIS）對(duì)宮頸癌細(xì)胞增殖的影響，同時(shí)實(shí)驗(yàn)應(yīng)該遵循對(duì)照原則和單因素變量原則。實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)思路：

①取培養(yǎng)瓶若干，將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的Hela細(xì)胞隨機(jī)均分為若干組，分別置于若干個(gè)培養(yǎng)瓶中并加入等量的培養(yǎng)液。

②實(shí)驗(yàn)分為四組進(jìn)行，分別標(biāo)記為甲（作為對(duì)照組），乙丙丁（（作為實(shí)驗(yàn)組））。

甲組：不作處理；

乙組：加入適量且等量的適宜濃度的BTZ溶液；

丙組：加入適量且等量的適宜濃度的CIS溶液；

丁組：加入適量且等量的適宜濃度的BTZ溶液、CIS溶液。

③將培養(yǎng)瓶放入CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48小時(shí)后，分別取樣檢測(cè)相關(guān)蛋白含量，并用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡數(shù)量。

④統(tǒng)計(jì)、處理和分析實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。

（2）預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

（3）分析討論：

①HPV是一種雙鏈環(huán)狀DNA病毒，其遺傳物質(zhì)是DNA，DNA中堿基A=T和G=C，這被稱為DNA化學(xué)組成的卡伽夫法則。HPV誘發(fā)細(xì)胞癌變屬于生物因素。通過(guò)（2）預(yù)測(cè)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析可知，P53基因的作用是促進(jìn)正常細(xì)胞的分裂。

②DNA復(fù)制發(fā)生在細(xì)胞分裂間期的S期；DNA合成被阻斷后，G1、G2、M不受影響，G1期和S期的交界處受影響。