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基因工程利用某目的基因（圖甲）和Pl噬菌體載體（圖乙）構建重組DNA。限制性核酸內切酶的酶切位點分別是BglⅡ、EcoR I和Sau3A I。下列分析錯誤的是

A．構建重組DNA時，可用BglⅡ和Sau3A I切割目的基因和Pl噬菌體載體

B．構建重組DNA時，可用EcoR I和Sau3A I切割目的基因和Pl噬菌體載體

C．圖乙中的P1噬菌體載體只用EcoR I切割后，含有2個游離的磷酸基團

D．用EcoR I切割目的基因和P1噬菌體載體，再用DNA連接酶連接，只能產生一種重組DNA

 

【答案】

D

【解析】

試題分析：P1噬菌體載體是雙鏈環(huán)狀DNA分子，所有磷酸基團參與形成磷酸二酯鍵，故不含游離的磷酸基團，從圖2可以看出，質粒上只含有一個SmaⅠ的切點，因此被改酶切割后，質粒變?yōu)榫�性雙鏈DNA分子，因每條鏈上含有一個游離的磷酸基團，因此切割后含有兩個游離的磷酸基團；C正確。從圖甲看出，用EcoR I切割目的基因后兩端各有一切口，與圖乙中EcoR I切口對接時，可有兩種可能，即可產生兩種重組DNA；D錯誤。

考點：本題考查基因工程的相關知識，是學生提升獲取圖示信息、審題、分析能力的較好選擇。

 

練習冊系列答案
相關習題

科目：高中生物 來源：2012-2013學年湖南省益陽市一中高二上學期期末考試理科生物試卷（帶解析） 題型：綜合題

降鈣素是一種多肽類激素，臨床上用于治療骨質疏松癥等。人的降鈣素活性很低，半衰期較短。某科研機構為了研發(fā)一種活性高、半衰期長的新型降鈣素，將人工合成的降鈣素DNA與大腸桿菌的DNA分子進行重組，并成功的在大腸桿菌中得以表達。操作大體過程如下圖1、圖2，據圖回答下列問題：   

（1）圖1示人工合成降鈣素DNA的過程。從預期新型降鈣素的功能出發(fā)，推測相應的脫氧核苷酸序列，并人工合成了兩條72個堿基的DNA單鏈，兩條鏈通過18個堿基對形成部分雙鏈DNA片段，再利用Klenow酶補平，獲得雙鏈DNA。從功能看，Klenow酶是一種___________酶，合成的雙鏈DNA有________個堿基對。
（2）圖2將重組質粒導入大腸桿菌最常用的方法是用       處理，使細胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)。
（3）如果要通過基因工程獲得轉基因動物，將目的基因導入受體細胞最常用的方法是             。
（4）以下關于蛋白質工程的說法正確的是（  ）
A．蛋白質工程以基因工程為基礎          
B．蛋白質工程就是酶工程的延伸
C．蛋白質工程就是用蛋白酶對蛋白質進行改造  
D．蛋白質工程只能生產天然的蛋白質

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科目：高中生物 來源：2015屆吉林省高二上期期末考試生物卷（解析版） 題型：綜合題

請回答基因工程方面的有關問題：

(1)利用PCR技術擴增目的基因，其原理與細胞內DNA復制類似(如下圖所示)。圖中引物為單鏈 DNA 片段，它是子鏈合成延伸的基礎。

①從理論上推測，第四輪循環(huán)產物中含有引物 A 的 DNA 片段所占的比例為________。

②在第________輪循環(huán)產物中開始出現兩條脫氧核苷酸鏈等長的 DNA 片段。

(2)設計引物是 PCR 技術關鍵步驟之一。某同學設計的兩組引物(只標注了部分堿基序列)都不合理(如下圖)，請分別說明理由。

①第 1 組：________________________；

②第 2 組：________________________。

(3)PCR反應體系中含有熱穩(wěn)定 DNA 聚合酶，下面的表達式不能正確反映 DNA 聚合酶的功能，這是因為____________________________________________________________。

(4)用限制酶 EcoRV 、MboⅠ單獨或聯合切割同一種質粒，得到的 DNA 片段長度如下圖(1 kb 即 1 000 個堿基對)，請畫出質粒上 EcoRV 、MboⅠ的切割位點。

 

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科目：高中生物 來源：2012-2013學年浙江省高三高考仿真模擬理科生物試卷 題型：綜合題

肺細胞中的let一7基因表達減弱，癌基因RAS表達增強，會引發(fā)肺癌。研究人員利用基因工程技術將let一7基因導入肺癌細胞實現表達增強后，發(fā)現肺癌細胞的增殖受到抑制。該基因工程技術基本流程如圖1。

(1)進行過程①時，需用             酶切開載體以插入let一7基因。進行過程②時，需用         酶處理貼附在培養(yǎng)皿壁上的細胞，以利于 細胞培養(yǎng)。采用PCR技術擴增let一7基因時，在PCR反應體系的主要成分應包含：擴增緩沖液(含Mg2+)、水、4種脫氧核糖核苷酸、模板DNA、耐高溫的DNA聚合酶和引物l和引物Ⅱ等，若在該反應體系中，目的基因擴增了5代，則具有引物I的DNA所占的比例理論上為        。

(2)研究發(fā)現，let一7基因能影響癌基因RAS的表達，其影響機理如圖2。據圖分析，可從細胞中提取    進行分子雜交，以直接檢測1et一7基因是否轉錄。肺癌細胞增殖受到抑制，可能是由于細胞中    (RASmRNA／RAS蛋白質)含量減少引起的。

(3)現有一長度為1000堿基對(bp)的DNA分子，用限制酶切開后得到仍是長度為1000 bp的DNA分子，說明此DNA分子的形態(tài)為                  。

(4)某線性DNA分子分別用限制酶Hind Ⅲ和Sma I處理，然后用這兩種酶同時處理，得到如下片段(kb為千個堿基對)：

限制酶

    片段及長度

Hind Ⅲ

    2.5 kb，5.0 kb

Sma I

    2.0 kb，5.5 kb

Hind Ⅲ和Sma I

    2.5 kb，3.0 kb，2.0 kb

可以推知限制酶Hind Ⅲ和Sma I在此DNA分子中分別有            個識別序列。兩酶同時處理后得到的片段，再用限制酶EcoR I處理，結果導致凝膠上3．0 kb的片段消失，產生一種1.5 kb的新片段；那么如果用限制酶HindⅢ和EcoR I將該線性DNA分子進行切割，則可得到長度分別為           的片段。

 

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科目：高中生物 來源：2014屆湖南省益陽市高二上學期期末考試理科生物試卷（解析版） 題型：綜合題

降鈣素是一種多肽類激素，臨床上用于治療骨質疏松癥等。人的降鈣素活性很低，半衰期較短。某科研機構為了研發(fā)一種活性高、半衰期長的新型降鈣素，將人工合成的降鈣素DNA與大腸桿菌的DNA分子進行重組，并成功的在大腸桿菌中得以表達。操作大體過程如下圖1、圖2，據圖回答下列問題：   

（1）圖1示人工合成降鈣素DNA的過程。從預期新型降鈣素的功能出發(fā)，推測相應的脫氧核苷酸序列，并人工合成了兩條72個堿基的DNA單鏈，兩條鏈通過18個堿基對形成部分雙鏈DNA片段，再利用Klenow酶補平，獲得雙鏈DNA。從功能看，Klenow酶是一種___________酶，合成的雙鏈DNA有________個堿基對。

（2）圖2將重組質粒導入大腸桿菌最常用的方法是用       處理，使細胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)。

（3）如果要通過基因工程獲得轉基因動物，將目的基因導入受體細胞最常用的方法是             。

（4）以下關于蛋白質工程的說法正確的是（  ）

A．蛋白質工程以基因工程為基礎          

B．蛋白質工程就是酶工程的延伸

C．蛋白質工程就是用蛋白酶對蛋白質進行改造  

D．蛋白質工程只能生產天然的蛋白質

 

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科目：高中生物 來源：2010年廣東省高二上學期期中考試生物試卷 題型：綜合題

（每空2分，共11分）請分析回答基因工程的相關問題：

（1）（3分）基因工程的理論基礎是         法則，可用公式（圖解）表示為        

                              。?

（2）（4分）利用PCR技術（全稱：                    ）可以擴增目的基因，即在試管中進行DNA的人工復制獲得大量DNA克隆分子。某樣品DNA中共含有3000個堿基對，堿基數量滿足：（A+T）：（G+C）=1 ：2，現計劃通過PCR得到100個與樣品相同的DNA，至少需要向試管中加入          個腺嘌呤脫氧核苷酸。

（3）（4分）為了解基因結構，通常選取一特定長度的線性DNA分子，先用一種限制酶切割，通過電泳技術將單酶水解片段分離，計算相對大�。蝗缓笤儆昧硪环N酶對單酶水解片段進行降解，分析片斷大小。下表是某小組進行的相關實驗。

已知一線性DNA序列共有5000bp（bp為堿基對）

第一步水解

產物

（單位bp）

第二步水解

產物

（單位bp）

A酶切割

1900

將第一步水解產物分離后，分別用B酶切割

1700  200

1500

800  700

1600

1100 500

 

由實驗可知，在這段已知序列上，A酶與B酶的識別序列分別為         個和         個。

 

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