Question

【題目】某興趣小組進行探究“培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量與時間的變化關(guān)系”實驗，用血 細胞計數(shù)板計數(shù)酵母菌數(shù)量。血細胞計數(shù)板是一個特制的可在顯微鏡下觀察的玻璃制品，樣品滴在計數(shù)室內(nèi)。計數(shù)室由25個中格、每個中格由16個小格組成，每個汁數(shù)室容納 液體的總體積為0.1mm3。操作如下：

第一步：配制5%葡萄糖培養(yǎng)液500mL。

第二步：將500mL5%的葡萄糖培養(yǎng)液置于錐形瓶中，把0.lg活性千酵母加入5%葡萄糖溶液中，25℃下恒溫培養(yǎng)。

第三步：連續(xù)7天，每天隨機抽時間取樣，用血球計數(shù)板計數(shù)酵母菌數(shù)量，每次重復(fù)3次，求平均值，并做好記錄。

第四步：根據(jù)記錄的實驗結(jié)果，畫出酵母菌種群數(shù)量與時間的變化曲線。

回答下列問題：

（1）指出并改正實驗操作識驟第三步中的一處錯錯誤_______________。

（2）本實驗過粒中，封培養(yǎng)液中的酵母菌逐個計數(shù)是非常常困難的，可以采用___________法。

（3）從試管中吸出培養(yǎng)液迸行計數(shù)之前，需將試管輕輕振蕩幾次，以保證估算的準確性，減少誤差。如果取樣前沒有振蕩試管，直接取上層培養(yǎng)液，觀察得到的數(shù)據(jù)的誤差是___________（填“偏大”或“偏小”）。

（4）某同學(xué)第5d在使用血球計數(shù)板計數(shù)時做法如下：

①振蕩搖勻試管，取1mL培養(yǎng)液并稀釋100倍，稀釋樣液的無菌水中加入了幾滴臺朌藍染液。

②先將蓋玻片放在計數(shù)室上，用吸管吸取稀釋后的培養(yǎng)液滴邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入，多余培養(yǎng)液滲入___________，制作好臨時裝片。

③顯微鏡下觀察并計數(shù)：在觀察汁數(shù)時只統(tǒng)計___________（填“被”或“不被”）染成藍色的酵母菌。如果一個小格內(nèi)酵母菌過多，難以數(shù)清，則應(yīng)當將樣液適當___________再計數(shù)。

④下圖1所示為視野內(nèi)一個小格（“●”代表活的酵母菌），該小格中酵母菌數(shù)量為__________個。下圖2所示的a、h、c、d、e5個中格（80個小格）內(nèi)若有活的酵母菌40個，則lmL酵母菌培養(yǎng)液樣品中菌體數(shù)最接近__________個。

（5）拫據(jù)每天測量的教據(jù)描繪出的酵母菌種群數(shù)量變化呈S型增長，培養(yǎng)后期菌群數(shù)量下降可能的原因是__________。

Answer 1

【答案】隨機抽時間取樣改為定時取樣； 抽樣檢測 偏小 （凹）槽內(nèi) 不被 釋稀 6 2×106 營養(yǎng)物質(zhì)逐漸被消耗、pH改變、有害物質(zhì)的積累等

【解析】

本題考查了探究培養(yǎng)液中酵母菌種群數(shù)量的變化的實驗方面的相關(guān)知識，要求考生掌握調(diào)查的方式和實驗過程中的相關(guān)注意點；學(xué)會酵母菌計數(shù)的方法，并能利用公式對數(shù)量進行計算，難度適中．

（1）該實驗的自變量是時間，為了控制單一變量，應(yīng)將隨機抽時間取樣改為定時取樣。

（2）培養(yǎng)液中酵母菌的數(shù)量比較多，逐個計數(shù)是非常困難的，通常采用抽樣檢測法進行計數(shù)是，使用血細胞計數(shù)板進行計數(shù)。

（3）從試管中吸出培養(yǎng)液進行計數(shù)之前，需將試管輕輕振蕩幾次，以保證估算的準確性，減少誤差。如果取樣前沒有振蕩試管，酵母菌細胞在底部，直接取上層培養(yǎng)液，觀察得到的數(shù)據(jù)的誤差是偏小。

（4）①振蕩搖勻試管，取1mL培養(yǎng)液并稀釋100倍，稀釋樣液的無菌水中加入了幾滴臺盼藍染液。

②先將蓋玻片放在計數(shù)室上，用吸管吸取稀釋后的培養(yǎng)液滴于其邊緣，讓培養(yǎng)液自行滲入，否則計數(shù)偏大，多余培養(yǎng)液滲入(凹)槽內(nèi)，作好臨時裝片。

③顯微鏡下觀察計數(shù)，由于臺盼藍可以將死的酵母菌染成藍色，死亡的細胞膜失去了選擇透過性，活的酵母菌仍為無色，因此在觀察計數(shù)時只統(tǒng)計不被染成藍色的酵母菌，如果一個小格內(nèi)酵母菌過多，難以數(shù)清，則應(yīng)當將樣液適當稀釋再計數(shù)。

④壓在方格線上的細胞只計相鄰兩邊及其夾角上的細胞數(shù)，壓在方格線上左線和上線及夾角的細胞數(shù)共3個，方格內(nèi)細胞數(shù)是3個，因此該中格內(nèi)酵母菌數(shù)量應(yīng)計為6個。圖2所示的a、b、c、d、e5個中格(80個小格)內(nèi)若有活的酵母菌40個，1mL=1cm3=1000mm3，1mL酵母菌培養(yǎng)液樣品中菌體數(shù)約為(1000mm3/0.1mm3)×25×(40/5)=2×106。

（5）根據(jù)每天測量的數(shù)據(jù)描繪出的酵母菌種群數(shù)量變化呈S型增長，培養(yǎng)后期由于營養(yǎng)物質(zhì)被消耗、pH改變、有害物質(zhì)的積累等原因?qū)е戮�群�?shù)量下降。