Question

【題目】下圖表示利用生物技術(shù)獲得轉(zhuǎn)基因豬和轉(zhuǎn)基因煙草的過程(圖中數(shù)字表示過程或技術(shù)，字母表示物質(zhì)或結(jié)構(gòu))。請回答下列問題：

(1)為分離、提純蘇云金芽孢桿菌，先用________培養(yǎng)基進行擴大培養(yǎng)，再用________法進行分離，獲得一個個單獨的________________。

(2)研究過程中，采用________技術(shù)對目的基因進行擴增，然后將目的基因與質(zhì)粒等載體結(jié)合形成了重組質(zhì)粒。在重組質(zhì)粒的構(gòu)建過程中需要的工具酶有___________________________________。

(3)圖中②代表________技術(shù)。培養(yǎng)C中的ES細胞時，一般要在培養(yǎng)皿底部制備一層胚胎成纖維細胞，目的是________________________________________________________________。

(4)若在0.5～0.6 mol/L的________溶液中用特定的酶處理D，可獲得原生質(zhì)體。若將含有D的培養(yǎng)物放在搖床上，通過______________培養(yǎng)可以分散成單細胞，這些單細胞具有________細胞的特征。

(5)使用自然生長的煙草莖進行組織培養(yǎng)，需要依次在70%酒精和________溶液中浸泡消毒。各種器皿和培養(yǎng)基等通常用________________法滅菌。

(6)從經(jīng)特定免疫處理的豬中提取B淋巴細胞，與______________________________________

融合，形成雜交細胞，經(jīng)篩選、克隆化培養(yǎng)后，獲得的單一細胞特征是_____________________。

Answer 1

【答案】 LB液體 劃線分離(涂布分離) 菌落 PCR(聚合酶鏈式反應) 限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶 胚胎體外培養(yǎng) 促進ES細胞生長、抑制其分化 甘露醇 液體懸浮 胚性 5%次氯酸鈉 高壓蒸汽滅菌 骨髓瘤細胞 既能產(chǎn)生特異性抗體，又能無限增殖

【解析】分析題圖：圖示為利用生物技術(shù)獲得生物新品種的過程，其中①表示獲取目的基因的過程，則A為目的基因，B為重組DNA分子；②表示早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)；③表示胚胎移植；④⑤表示植物組織培養(yǎng)過程，D表示愈傷組織，E表示胚狀體。

（1）蘇云金芽孢桿菌可用LB液體培養(yǎng)基進行擴大培養(yǎng)；分離微生物常用平板劃線法或稀釋涂布平板法，這樣可以獲得一個個單獨的菌落。

（2）PCR（聚合酶鏈式反應）技術(shù)可在體外大量擴增目的基因；構(gòu)建基因表達載體時，首先需要用同種限制酶切割運載體和含有目的基因的外源DNA分子，其次需要用DNA連接酶將目的基因和運載體連接形成重組質(zhì)粒。

（3）圖中②代表胚胎體外培養(yǎng)技術(shù)。若培養(yǎng)C中的ES細胞，一般在培養(yǎng)皿底部制備一層胚胎成纖維細胞，目的是促進生長抑制分化。

（4）若在0.5-0.6mol/L的甘露醇溶液環(huán)境下用特定的酶（纖維素酶和果膠酶）處理D，可獲得原生質(zhì)體。若將含有D的培養(yǎng)物放在搖床上，通過液體懸浮培養(yǎng)可以分散成單細胞，這些單細胞具有胚性細胞的特征。

（5）使用自然生長的煙草莖進行組織培養(yǎng)，需要依次在70%酒精和5%次氯酸鈉溶液中浸泡消毒。各種器皿和培養(yǎng)基等通常用高壓蒸汽滅菌法滅菌。

（6）制備單克隆抗體時，將漿細胞與骨髓瘤融合，經(jīng)篩選，克隆培養(yǎng)后，獲得既能產(chǎn)生特異抗體，又能無限增殖的雜交瘤細胞。