Question

【題目】生活飲用水的微生物安全性日常檢測(cè)是很重要的。請(qǐng)回答下列問題：

（1）培養(yǎng)大腸桿菌所用的LB培養(yǎng)基一般用________法滅菌。檢驗(yàn)大腸桿菌的含量時(shí)，通常將水樣用_________進(jìn)行一系列的梯度稀釋。

（2）將稀釋后的水樣分別接種到LB固體培養(yǎng)基，_______（填“正置/倒置”）于恒溫培養(yǎng)箱，在_____℃條件進(jìn)行培養(yǎng)。用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)_________（填“需要/不需要”）設(shè)置對(duì)照組。

（3）對(duì)于生活飲用水中大腸桿菌的數(shù)量統(tǒng)計(jì)，也可以采用濾膜法，該法是利用濾膜的直徑_______（填“大于/小于”）大腸桿菌的直徑，將大腸桿菌留在濾膜上進(jìn)行的計(jì)數(shù)。

（4）下圖表示培養(yǎng)和純化大腸桿菌的部分操作步驟，下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是_____（多選）。

A．步驟①倒平板操作時(shí)，倒好后應(yīng)立即將其倒過來放置

B．步驟②接種環(huán)火焰上灼燒后迅速蘸取菌液后劃線

C．步驟③多個(gè)方向劃線，使接種物逐漸稀釋，培養(yǎng)后出現(xiàn)單個(gè)菌落

D．步驟④恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)后可用來對(duì)大腸桿菌進(jìn)行計(jì)數(shù)

Answer 1

【答案】 高壓蒸汽滅菌 無菌水 倒置 37 需要 小于 ABD

【解析】試題分析：要驗(yàn)證培養(yǎng)基是否滅菌徹底應(yīng)設(shè)置一個(gè)空白對(duì)照，即將未接種的培養(yǎng)基放在適宜的條件下培養(yǎng)，若無菌落出現(xiàn),則證明培養(yǎng)基滅菌徹底。由圖可知，①是倒平板，②是用接種環(huán)沾取菌液，③是進(jìn)行平板劃線，④是培養(yǎng)。

（1）對(duì)培養(yǎng)基滅菌，一般都采用高壓蒸汽滅菌法。為了防止其他雜菌污染，在檢驗(yàn)大腸桿菌的含量時(shí)，通常將水樣用無菌水進(jìn)行一系列的梯度稀釋。

（2）將稀釋后的水樣分別接種到LB固體培養(yǎng)基，倒置于恒溫培養(yǎng)箱，在37℃條件進(jìn)行培養(yǎng)。用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)需要設(shè)置對(duì)照組，主要是對(duì)比觀察是否有雜菌滋生。

（3）濾膜法統(tǒng)計(jì)生活飲用水中大腸桿菌的數(shù)量，是利用濾膜的直徑小于大腸桿菌的直徑，將大腸桿菌留在濾膜上進(jìn)行的計(jì)數(shù)。

（4）步驟①倒完平板后立即蓋上培養(yǎng)皿，冷卻后將平板倒過來放置，有利于表面的水分更好的揮發(fā)和防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染，A錯(cuò)誤；步驟②接種環(huán)火焰上灼燒后，應(yīng)在火焰旁冷卻后再蘸取菌液后劃線，主要是防止高溫接種環(huán)殺死菌種，B錯(cuò)誤；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時(shí)，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時(shí)菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落，C正確；步驟④恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)后不一定可用來對(duì)大腸桿菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，因?yàn)閼?yīng)選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，D錯(cuò)誤。