Question

【題目】我國(guó)曾經(jīng)發(fā)生過(guò)因“非典型性肺炎”而死亡的病例，經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，該病是由SARS病毒(一種RNA病毒)感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康復(fù)后的血清中有抗S蛋白的特異性抗體。某研究小組為了研制預(yù)防SARS病毒的疫苗，開(kāi)展了前期研究工作，其簡(jiǎn)要的操作流程如圖：

(1)實(shí)驗(yàn)步驟①所代表的反應(yīng)過(guò)程是______________________。

(2)步驟②構(gòu)建重組表達(dá)載體A和重組表達(dá)載體B必須使用限制酶和________酶，后者的作用是將用限制性核酸內(nèi)切酶切割的S蛋白基因和________________連接起來(lái)。

(3)如果省略步驟②而將大量擴(kuò)增的S蛋白基因直接導(dǎo)入大腸桿菌，一般情況下，不能得到表達(dá)的S蛋白，其原因是S蛋白基因在大腸桿菌中不能________________，也不能________________。

(4)為了檢驗(yàn)步驟④所表達(dá)的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同的免疫反應(yīng)特性，可用_________________與SARS康復(fù)病人血清進(jìn)行抗原—抗體特異性反應(yīng)實(shí)驗(yàn)，從而得出結(jié)論。

(5)步驟④和⑥的結(jié)果相比，原核細(xì)胞表達(dá)的S蛋白與真核細(xì)胞表達(dá)的S蛋白的氨基酸序列________(填“相同”或“不同”)，根本原因是______________________。

Answer 1

【答案】（1）逆轉(zhuǎn)錄 （2）DNA連接 載體 S基因（3）復(fù)制 合成S基因的mRNA（4）大腸桿菌中表達(dá)的S蛋白 SARS康復(fù)病人血清（5）相同 表達(dá)蛋白質(zhì)所用的基因相同

【解析】試題分析：⑴據(jù)圖可知，過(guò)程①是以RNA為模板合成DNA的過(guò)程，即是逆轉(zhuǎn)錄。⑵基因表達(dá)載體的構(gòu)建需要使用限制酶和DNA連接酶；DNA連接酶的作用是將目的基因和運(yùn)載體連接在一起。⑶若把S基因直接導(dǎo)入大腸桿菌，S基因很難把自己整合到細(xì)菌的DNA上，這樣的S基因是無(wú)法復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的；要想檢驗(yàn)大腸桿菌中表達(dá)的S蛋白是否與病毒S蛋白有相同作用，必須要獲得病毒S蛋白，根據(jù)免疫知識(shí)，SARS康復(fù)病人血清應(yīng)該含有該物質(zhì)。⑷檢測(cè)蛋白質(zhì)的方法是抗原抗體雜交，即將大腸桿菌中表達(dá)的S蛋白與SARS康復(fù)病人血清（含有抗S蛋白的抗體）結(jié)合。⑸由于基因相同，因此所表達(dá)的蛋白質(zhì)中氨基酸序列也應(yīng)相同。