Question

【題目】動物細胞培養(yǎng)技術(shù)是其他動物細胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)，請回答下列有關(guān)動物細胞培養(yǎng)的問題：

（1）在培養(yǎng)瓶中進行動物細胞培養(yǎng)時，需兩次用到胰蛋白酶，第一次使用的目的是將組織分散成單個細胞，此次的胰蛋白酶也可用____________酶代替。由于動物細胞培養(yǎng)具有____________、____________現(xiàn)象，因此需第二次用該酶處理，然后分瓶培養(yǎng)。在培養(yǎng)過程中，應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，目的是________________________。

（2）目前使用的或冷凍保存的正常細胞通常為____________代以內(nèi)的細胞，以保持細胞正常的____________核型。

（3）在單克隆抗體制備過程中，將獲得__________________________（答出兩個特點）的雜交瘤細胞進行____________培養(yǎng)和抗體檢測以后，再經(jīng)過多次篩選，可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細胞。利用滅活的病毒可以誘導(dǎo)產(chǎn)生雜交瘤細胞，其中的滅活是指____________________________________。

Answer 1

【答案】膠原蛋白??? 貼壁生長??? 接觸抑制??? 清除代謝產(chǎn)物，防止細胞代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害??? 10??? 二倍體??? 既能產(chǎn)生特異性抗體，又能無限增殖??? 克隆化??? 利用物理或化學(xué)手段使病毒失去感染能力，但是并不破壞這些病原體的抗原結(jié)構(gòu)???

【解析】

動物細胞培養(yǎng)：

1、當貼壁細胞分裂生長到互相接觸時，細胞就會停止分裂，此時需要將出現(xiàn)接觸抑制的細胞重新使用胰蛋白酶處理；

2、單克隆抗體的制備：①制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細胞；②獲得雜交瘤細胞；③克隆化培養(yǎng)和抗體檢測；④將雜交瘤細胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖；⑤提取單克隆抗體。

（1）在培養(yǎng)瓶中進行動物細胞培養(yǎng)時，第一次使用胰蛋白酶的目的是將組織分散成單個細胞，此次的胰蛋白酶也可用膠原蛋白酶代替。由于正常動物細胞具有貼壁生長和接觸抑制的特點，故培養(yǎng)到一定階段需要第二次用胰蛋白酶處理，然后分瓶培養(yǎng)。在培養(yǎng)過程中，常要清除代謝產(chǎn)物，防止細胞代謝產(chǎn)物積累對細胞自身造成危害，故需要定期更換培養(yǎng)液。

（2）目前使用的或冷凍保存的正常細胞通常為10代以內(nèi)的細胞，以保持細胞正常的二倍體核型。

（3）在單克隆抗體制備過程中，將獲得既能產(chǎn)生特異性抗體，又能無限增殖的雜交瘤細胞進行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測以后，再經(jīng)過多次篩選，可獲得足夠數(shù)量的能分泌所需抗體的細胞，將這些細胞在體外做大規(guī)模培養(yǎng)或注入小鼠腹腔內(nèi)增殖，從細胞培養(yǎng)液和小鼠腹水中就可獲得大量的單克隆抗體。滅活是指利用物理或化學(xué)手段使病毒失去感染能力，但是并不破壞這些病原體的抗原結(jié)構(gòu)