Question

【題目】瓊脂是制備固體培養(yǎng)基必需的材料，避免污染環(huán)境，實驗室使用過的廢棄固體培養(yǎng)基必須經(jīng)細菌分解才能丟棄。糖蜜發(fā)酵廢液的黑褐色色素是造成河、湖色澤污染的原因之一，為了脫除這種黑褐色色素，某實驗小組從瓊脂生產(chǎn)廠附近的土壤中篩選到多株具有脫色能力的瓊脂分解菌，其能產(chǎn)生脫色酶，并通過氧化方式進行脫色作用。回答下列問題：

（1）為了篩選可分解瓊脂的細菌，在配制培養(yǎng)基時，應(yīng)選擇以_______為唯一碳源的固體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。配制好的培養(yǎng)基需通過_______法進行滅菌。

（2）實驗小組可采用_______法分離土壤浸出液中的瓊脂分解菌。鑒定瓊脂分解菌時，可在培養(yǎng)基中加入_______，適宜條件下培養(yǎng)一段時間，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上形成圓形凹穴，其形成的原因是_______；應(yīng)選擇_______的菌落進行擴大培養(yǎng)。

（3）進行污染物脫色時，需將瓊脂分解菌擴大培養(yǎng)以加速脫色，通過不斷增加營養(yǎng)物質(zhì)的比例能否提高該菌的種群密度，并分析說明原因______________

（4）進行污染物脫色時，可提取瓊脂分解菌中的脫色酶固定化后用于脫色，固定化酶的優(yōu)點有______________（至少答出兩點）。

Answer 1

【答案】瓊脂 高壓蒸汽滅菌 稀釋涂布平板法、平板劃線 糖蜜發(fā)酵廢液的黑褐色色素 瓊脂分解菌分解瓊脂出現(xiàn)凹穴 凹穴大且周圍透明圈大 否，營養(yǎng)物質(zhì)濃度增高，滲透壓也升高，會導致細菌滲透失水，不利于其生長 既能與反應(yīng)物接觸，又能與產(chǎn)物分離；可反復使用，降低成本

【解析】

1、選擇培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入相應(yīng)的特殊營養(yǎng)物質(zhì)或化學物質(zhì)，抑制不需要的微生物的生長，有利于所需微生物的生長。
2、微生物常見的接種的方法
①平板劃線法：將已經(jīng)溶化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。
②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

（1）為了篩選分解瓊脂的細菌，在配制培養(yǎng)基時，應(yīng)選擇以瓊脂為唯一碳源的固體培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。配制好的培養(yǎng)基通過高壓蒸汽滅菌法進行滅菌。

（2）可通過稀釋涂布平板法、平板劃線法分離土壤浸出液中的瓊脂分解菌。由于糖蜜發(fā)酵廢液的黑褐色色素是造成河、湖色澤污染的原因之一，篩選出來的微生物應(yīng)具有脫除這種黑褐色色素的能力，故鑒定瓊脂分解菌時，可在培養(yǎng)基中加入糖蜜發(fā)酵廢液的黑褐色色素，適宜條件下培養(yǎng)一段時間，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上形成圓形凹穴，是因為瓊脂分解菌分解瓊脂出現(xiàn)凹穴造成的；可選擇凹穴大且周圍透明圈大的菌落進行擴大培養(yǎng)。

（3）由于營養(yǎng)物質(zhì)濃度增高，滲透壓也升高，會導致細菌滲透失水，不利于其生長，所以不能通過不斷增加營養(yǎng)物質(zhì)的比例提高該菌的種群密度。

（4）固定化酶的優(yōu)點有既能與反應(yīng)物接觸，又能與產(chǎn)物分離；可反復使用，降低成本。