Question

下表中列出幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖1、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點。請回答下列問題。

（1）一個圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)SmaⅠ切割前后，分別含有　　　　個游離的磷酸基團(tuán)。
（2）若對圖中質(zhì)粒進(jìn)行改造，插入SmaⅠ酶切位點越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越　　　。用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用SmaⅠ，原因是　　　　　　　　　　。
（3）與使用EcoRⅠ相比較，使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時處理質(zhì)粒、外源DNA的優(yōu)點在于可以防止　　　　　　　。
（4）為了獲取重組質(zhì)粒，將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合，并加入　　　酶。重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了　　　　　　　。
（5）為了從cDNA文庫中分離獲取蔗糖轉(zhuǎn)運蛋白基因，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體，然后在　　　　　　　　　的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，以完成目的基因表達(dá)的初步檢測。

Answer 1

（7分）
（1）0，2　（2）高　SmaⅠ會破壞質(zhì)粒的抗性基因，外源DNA中的目的基因　
（3）質(zhì)粒和合目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化
（4）DNA連接　鑒定和篩選合目的基因的細(xì)胞　
（5）蔗糖為唯一含碳營養(yǎng)物質(zhì)

解析