Question

下表中列出幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖1、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點，請回答下列問題

限制酶	BamHⅠ	Hind Ⅲ	EcoRⅠ	SmaⅠ
識別序列及 切割位點	G↓GATC C C CTAG↑G	A↓AGCT T T TCGA↑A	G↓AATT C C TTAA↑G	CCC↓GGG GGG↑CCC

(1)一個圖Ⅰ所示的質(zhì)粒分子經(jīng)SmaⅠ切割后，含有         個游離的磷酸基因

(2)若對圖中質(zhì)粒進行改造，插入的SmaⅠ酶切位點越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越               

(3)用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用Sma Ⅰ切割，原因是                                           .

(4)與只使用EcoRⅠ相比較，使用BmaHⅠ和Hind Ⅲ兩種限制酶同時處理質(zhì)粒、外源DNA的優(yōu)點在于可以防止              。

(5)為了獲取重組質(zhì)粒，將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合，并加入                酶

(6)重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了                。

(7)為了從cDNA文庫中分離獲取蔗糖轉(zhuǎn)運蛋白基因，將重組質(zhì)粒導入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體，然后在          的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，以完成目的基因表達的初步檢測

 

Answer 1

【答案】

（1）2  （2）強  （高） （3）會破壞質(zhì)粒上唯一標記基因和外源DNA的目的基因 （4）質(zhì)粒及目的基因自身連接 （5）DNA連接  （6）篩選和鑒定重組質(zhì)粒是否導入受體細胞（7）蔗糖

【解析】略