Question

【題目】馬鈴薯塊莖含有大量的淀粉，富含多種維生素和無(wú)機(jī)鹽，我國(guó)已將馬鈴薯作為主糧產(chǎn)品進(jìn)行產(chǎn)業(yè)化開(kāi)發(fā)。下圖是轉(zhuǎn)基因抗鹽馬鈴薯的培育過(guò)程，請(qǐng)分析回答問(wèn)題：

（1）為獲取抗鹽基因，可以從堿蓬細(xì)胞研磨液中提取抗鹽基因的 來(lái)合成cDNA。

（2）上圖構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，最好選用 酶切割含目的基因的外源DNA和質(zhì)粒，以防止目的基因、質(zhì)粒自身環(huán)化，但不能使用Sma l切割的原因是 。構(gòu)建好的重組質(zhì)粒在抗鹽基因前要加上特殊的啟動(dòng)子，啟動(dòng)子是一段有特殊序列的 片段。

（3）將基因表達(dá)載體導(dǎo)入農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA上的原因是 。通過(guò)農(nóng)桿菌的轉(zhuǎn)化作用，使抗鹽基因插入到馬鈴薯細(xì)胞中的染色體DNA上，從而使抗鹽基因的遺傳特性得以 。

（4）上圖轉(zhuǎn)基因抗鹽馬鈴薯培育過(guò)程中，屬于脫分化階段的是 （填序號(hào)）。從個(gè)體生物學(xué)水平上檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因抗鹽馬鈴薯是否培育成功的方法是 。

Answer 1

【答案】（1）mRNA（1分） （2）EcoRⅠ和HindⅢ SmaⅠ會(huì)破壞質(zhì)粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因 DNA （3）T-DNA是可以轉(zhuǎn)移的DNA 穩(wěn)定維持和表達(dá) （4）⑤ 將轉(zhuǎn)基因馬鈴薯幼苗栽種在鹽堿地或較高濃度鹽溶液中，觀察是否能正常生長(zhǎng)

【解析】（1）cDNA是逆轉(zhuǎn)錄合成的DNA片段，需要從供體細(xì)胞中提取目的基因轉(zhuǎn)錄的mRNA為模板。（2）在構(gòu)建基因表達(dá)載體過(guò)程中，選擇限制酶的原則是不能破壞目的基因和質(zhì)粒上的標(biāo)記基因且能將目的基因兩端以及質(zhì)粒同時(shí)切割開(kāi)來(lái)，所以可以選擇EcoRⅠ和HindⅢ，不能使用Sma l切割的原因是SmaⅠ會(huì)破壞質(zhì)粒的抗性基因和外源DNA中的目的基因。構(gòu)建好的重組質(zhì)粒在抗鹽基因前要加上特殊的啟動(dòng)子，啟動(dòng)子是一段有特殊序列的DNA片段。（3）將基因表達(dá)載體導(dǎo)入農(nóng)桿菌中的Ti質(zhì)粒上的T-DNA上的原因是T-DNA是可以轉(zhuǎn)移的DNA。通過(guò)轉(zhuǎn)化作用，使抗鹽基因插入到馬鈴薯細(xì)胞中的染色體DNA上，從而使抗鹽基因的遺傳特性得以穩(wěn)定維持和表達(dá)。（4）上圖轉(zhuǎn)基因抗鹽馬鈴薯培育過(guò)程中，⑤是脫分化階段，⑥是再分化階段。從個(gè)體生物學(xué)水平上檢驗(yàn)轉(zhuǎn)基因抗鹽馬鈴薯是否培育成功的方法是將轉(zhuǎn)基因馬鈴薯幼苗栽種在鹽堿地或較高濃度鹽溶液中，觀察是否能正常生長(zhǎng)。