Question

【題目】某同學(xué)要分離土壤中能分解尿素的細菌，并統(tǒng)計每克土壤樣品中活菌數(shù)目，培養(yǎng)基配方如下。將各種物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000mL，再經(jīng)高溫滅菌，制成固體培養(yǎng)基備用。

KH2PO4	Na2HPO4	MgSO4·7H2O	蛋白胨	葡萄糖	尿素	瓊脂
1．4g	2．1g	0．2g	1．0g	10．0g	1．0g	15．0g

（1）根據(jù)培養(yǎng)基的成分判斷，該同學(xué)能否分離出土壤中分解尿素的細菌?_____（能/不能），原因是________________。

（2）培養(yǎng)基用___________方法滅菌，培養(yǎng)皿用__________方法滅菌，待培養(yǎng)基冷卻到___________℃左右時，在_____附近倒平板，等平板冷卻凝固后，將平板倒過來放置。

（3）統(tǒng)計土壤樣品中活菌數(shù)目：將土壤樣品稀釋100倍，然后將0．1mL稀釋液分別接種到3個平板上； 經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個平板上的菌落數(shù)分別為39、38和37．據(jù)此可得出土壤樣品的活菌數(shù)為___________．對獲得的目的菌種，可采用____的方法長期保存．

（4）培養(yǎng)分解尿素的細菌時，需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是__________________。

（5）實驗中使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過___________處理后才能丟棄，以防止微生物的擴散。

Answer 1

【答案】不能 培養(yǎng)基含蛋白胨，尿素不是唯一氮源，不能選擇出只以尿素為氮源的微生物（培養(yǎng)基含蛋白胨，蛋白胨中含有氮元素） 高壓蒸汽滅菌 干熱滅菌 50 酒精燈火焰 3．8×107 甘油管藏 將未接種的培養(yǎng)基在適宜溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生 滅菌

【解析】

篩選纖維素分解菌需要以纖維素為唯一的碳源的選擇培養(yǎng)基.分離纖維素分解菌計數(shù)時需要用稀釋涂布平板法接種。

（1）據(jù)表分析，表中的蛋白胨可以為微生物的生存提供氮源，不能選擇出只以尿素為氮源的微生物，所以不能分離尿素分解菌。

（2）微生物培養(yǎng)中的培養(yǎng)基常用高壓蒸汽滅菌法滅菌，玻璃器皿可以使用干熱滅菌。倒平板時需要培養(yǎng)基冷卻至50℃左右時在酒精燈火焰旁進行，等平板冷卻凝固后，將平板倒過來放置，可以防止培養(yǎng)皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。

（3）根據(jù)題意可知，每升樣液中的活菌數(shù)為（39+38+37）÷3÷0.1×100×1000=3.8×107。對獲得的目的菌種，可采用甘油管藏的方法長期保存。

（4）檢測培養(yǎng)基是否被污染，需要將未接種的培養(yǎng)基在適宜溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生，如果有菌落數(shù)目被污染，否則沒有被污染。

（5）為防止微生物污染環(huán)境和操作者，實驗結(jié)束后，使用過的培養(yǎng)基應(yīng)該進行滅菌后倒掉。