Question

【題目】請(qǐng)回答下列與基因工程有關(guān)的問(wèn)題。

（1）在基因工程中，獲取目的基因主要有兩大途徑，即____________和從____________中分離。

（2）基因工程的核心步驟是構(gòu)建基因表達(dá)載體，構(gòu)建基因表達(dá)載體需要用的工具酶是____________。在已經(jīng)構(gòu)建的基因表達(dá)載體中，調(diào)控目的基因表達(dá)的序列有____________；用于對(duì)目的基因進(jìn)行篩選的序列為_____________。

（3）在獲得目的基因后，可以采用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，該技術(shù)的前提是____________，以便根據(jù)這一序列合成引物。PCR技術(shù)中所利用的關(guān)鍵酶是____________。

（4）尼倫伯格、馬太破譯了編碼氨基酸的第一個(gè)遺傳密碼，如果說(shuō)他們的工作為基因的分離和合成提供了啟示，那么這一啟示是_____________。

Answer 1

【答案】人工合成??? 自然界已有的物種??? 限制酶和DNA連接酶??? 啟動(dòng)子和終止子??? 標(biāo)記基因??? 要有一段已知目的基因的核苷酸序列??? 熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）??? 自然界中從微生物到人類共用一套密碼子???

【解析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：

（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕�因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。

（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等。

（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣。將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。

（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因——DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA——分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)——抗原-抗體雜交技術(shù)。個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲(chóng)鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

（1）目的基因的獲取方法主要是人工合成和從基因文庫(kù)中獲取即從自然界已有的物種中分離。

（2）基因工程的核心步驟是構(gòu)建基因表達(dá)載體，其中用到的工具酶是限制酶剪切DNA片段，DNA連接酶鏈接DNA片段；基因表達(dá)載體上包含的元件有復(fù)制原點(diǎn)、目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等，其中調(diào)控目的基因表達(dá)的序列有啟動(dòng)子和終止子，對(duì)目的基因進(jìn)行篩選的序列是標(biāo)記基因。

（3）PCR技術(shù)的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列；其中用到的關(guān)鍵酶是熱穩(wěn)定DNA聚合酶。

（4）尼倫伯格、馬太破譯了編碼氨基酸的第一個(gè)遺傳密碼，他們的工作為基因的分離和合成提供的啟示是自然界中從微生物到人類共用一套密碼子。