Question

【題目】乙醇燃料已成為國際上普遍公認可降低環(huán)境污染和取代化石燃料的主要資源。可利用纖維素分解菌將植物秸稈中的纖維素降解為小分子糖類，后經(jīng)酵母菌發(fā)酵即可生產(chǎn)乙醇。下面是分離、篩選纖維素分解菌的部分過程，請回答相關(guān)問題：

（1）從富含纖維素的環(huán)境中分離得到纖維素分解菌，這說明尋找目的菌株的方法之一是___________。為了分離纖維素分解菌，在配制選擇培養(yǎng)基時以____________作為唯一碳源；從代謝類型分析，培養(yǎng)反芻動物胃中的纖維素分解菌時，必須提供無氧環(huán)境的原因是____________。

（2）在篩選纖維素分解菌時，可在培養(yǎng)基中加入_________染料，然后根據(jù)菌落周圍是否產(chǎn)生______來篩選目的菌株。

（3）純化菌株時，通常使用的劃線工具是____________。劃線的某個平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌落，第二劃線區(qū)域的第一條線上無菌落，其他劃線上有菌落。分析造成第二劃線區(qū)域的第一條線無菌落的可能原因是____________。

（4）初步篩選后，還需進行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實驗，纖維素酶活性的測定方法一般是____________。

Answer 1

【答案】到相應生存環(huán)境中尋找 纖維素 動物胃中的纖維素分解菌為異養(yǎng)厭氧型，在無氧條件下才能存活 剛果紅 透明圈 接種環(huán) 接種環(huán)灼燒未冷卻劃線（或未從第一區(qū)域末端開始） 對纖維素酶分解纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進行定量測定

【解析】

分解纖維素的微生物的分離實驗的原理：
①土壤中存在著大量纖維素分解酶，包括真菌、細菌和放線菌等，它們可以產(chǎn)生纖維素酶。纖維素酶是一種復合酶，可以把纖維素分解為纖維二糖，進一步分解為葡萄糖使微生物加以利用，故在用纖維素作為唯一碳源的培養(yǎng)基中，纖維素分解菌能夠很好地生長，其他微生物則不能生長。
②在培養(yǎng)基中加入剛果紅，可與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復合物，當纖維素被分解后，紅色復合物不能形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，從而可篩選纖維素分解菌。

（1）從富含纖維素的環(huán)境中分離得到纖維素分解菌，這說明尋找目的菌株的方法之一是到相應生存環(huán)境中尋找。為了分離纖維素分解菌，在配制選擇培養(yǎng)基時以纖維素作為唯一碳源；動物胃中的纖維素分解菌為異養(yǎng)厭氧型，在無氧條件下才能存活，因此培養(yǎng)反芻動物胃中的纖維素分解菌時，必須提供無氧環(huán)境。

（2）剛果紅染料可以與纖維素形成紅色復合物，故在篩選纖維素分解菌時，可在培養(yǎng)基中加入剛果紅染料，然后根據(jù)菌落周圍是否產(chǎn)生透明圈來篩選目的菌株。

（3）純化菌株時，通常使用的劃線工具是接種環(huán)。劃線的某個平板培養(yǎng)后，第一劃線區(qū)域的劃線上都不間斷地長滿了菌落，第二劃線區(qū)域的第一條線上無菌落，其他劃線上有菌落�？赡苁堑诙�次劃線過程中，接種環(huán)灼燒未冷卻劃線（或未從第一區(qū)域末端開始）導致。

（4）初步篩選后，還需進行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實驗，發(fā)酵方法有固體發(fā)酵和液體發(fā)酵；纖維素酶活性的測定方法一般是對纖維素酶分解纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進行定量測定。