Question

【題目】科學(xué)家把編碼霍亂毒素的無(wú)毒性β鏈基因轉(zhuǎn)移到苜蓿細(xì)胞后培育出轉(zhuǎn)基因苜蓿。其具體過(guò)程如下：

（1）構(gòu)建重組DNA分子常用的工具酶是____________和____________。

（2）圖中過(guò)程②采用的方法是____________，Ti質(zhì)粒的T—DNA上有一個(gè)tms片段能促進(jìn)生長(zhǎng)素的大量合成，在對(duì)Ti質(zhì)粒改造時(shí)____________（填“應(yīng)該”或“不應(yīng)該”）將該片段去除。

（3）該實(shí)驗(yàn)中將農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)入苜蓿細(xì)胞的原生質(zhì)體后，需再生細(xì)胞壁。請(qǐng)從理論上提出兩種實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)原生質(zhì)體是否再生出細(xì)胞壁的方法：①________________________；②________________________。

（4）把含有目的基因的苜蓿細(xì)胞培養(yǎng)成幼苗時(shí)，細(xì)胞先后經(jīng)過(guò)__________、__________兩個(gè)重要階段。

Answer 1

【答案】 限制酶 DNA連接酶 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法 應(yīng)該 將細(xì)胞置于高滲溶液中，用顯微鏡觀察是否發(fā)生質(zhì)壁分離 將細(xì)胞置于清水中，用顯微鏡觀察是否破碎 脫分化 再分化

【解析】試題分析：本題考查基因工程、細(xì)胞工程、質(zhì)壁分離實(shí)驗(yàn)，考查對(duì)基因工程操作步驟、組織培養(yǎng)過(guò)程、質(zhì)壁分離實(shí)驗(yàn)的理解和應(yīng)用。解答此題，可根據(jù)質(zhì)壁分離的原理檢測(cè)原生質(zhì)體是否再生出細(xì)胞壁。

（1）構(gòu)建重組DNA分子需要用同種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，并用DNA連接酶進(jìn)行鏈接。

（2）圖中過(guò)程②采用的方法是培育轉(zhuǎn)基因植物常用的農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法，在對(duì)Ti質(zhì)粒改造時(shí)應(yīng)該將T—DNA上促進(jìn)生長(zhǎng)素大量合成的tms片段去除，避免T—DNA進(jìn)入受體細(xì)胞后引起細(xì)胞快速分裂和生長(zhǎng)，形成腫瘤。

（3）細(xì)胞壁對(duì)植物細(xì)胞具有支持和保護(hù)作用，檢測(cè)原生質(zhì)體是否再生出細(xì)胞壁，一種方法是將細(xì)胞置于高滲溶液中，用顯微鏡觀察細(xì)胞是否因失水導(dǎo)致質(zhì)壁分離，另一種方法是將細(xì)胞置于清水中，用顯微鏡觀察細(xì)胞是否因大量吸水而漲破。

（4）含有目的基因的苜蓿細(xì)胞在組織培養(yǎng)過(guò)程中先后經(jīng)過(guò)脫分化和再分化兩個(gè)階段，最后發(fā)育為幼苗。