Question

【題目】Ⅱ型糖尿病病因復(fù)雜，多數(shù)是胰島素拮抗引起機(jī)體對(duì)胰島素的敏感性降低。胰島素單克隆抗體可用于快速檢測(cè)血清胰島素的含量。請(qǐng)回答下列有關(guān)胰島素單克隆抗體制備的問題：

（1）首先需要將人胰島素注射到健康成年小鼠體內(nèi)，其目的是獲取_____細(xì)胞；再將該細(xì)胞與_____相融合，以制取雜交瘤細(xì)胞。

（2）細(xì)胞融合過程體現(xiàn)了細(xì)胞膜的特性是具有_____。融合完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞外，理論上含有_____種兩兩融合的細(xì)胞。

（3）為檢驗(yàn)得到的雜交瘤細(xì)胞能否分泌胰島素抗體，可用_____與從雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)液中提取的抗體雜交。在體外條件下，當(dāng)培養(yǎng)的小鼠雜交瘤細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)，需進(jìn)行_____培養(yǎng)以得到更多數(shù)量的細(xì)胞。

（4）細(xì)胞融合技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是_____________。

Answer 1

【答案】能分泌抗人胰島素抗體的 B 小鼠骨髓瘤細(xì)胞 流動(dòng)性 3 人胰島素 傳代 突破了有性雜交的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能

【解析】

單克隆抗體的制備
（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原，然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。
（2）獲得雜交瘤細(xì)胞①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中形成的B淋巴細(xì)胞融合；②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。
（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)。
（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。
（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。

（1）胰島素單克隆抗體制備，首先需要將人胰島素注射到健康成熟小鼠體內(nèi)，其目的是獲取能分泌抗人胰島素抗體的B細(xì)胞；再將該細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞相融合，以制取雜交瘤細(xì)胞。
（2）細(xì)胞融合過程體現(xiàn)了細(xì)胞膜具有流動(dòng)性的特性。細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)完成后，融合體系中除含有未融合的細(xì)胞外，可能還有雜交瘤細(xì)胞、B細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞、骨髓瘤細(xì)胞相互融合形成的細(xì)胞共3種兩兩融合的細(xì)胞。
（3）為檢驗(yàn)得到的雜交瘤細(xì)胞能否分泌胰島素抗體，可用人胰島素與從雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)液中提取的抗體雜交。在體外條件下，當(dāng)培養(yǎng)的小鼠雜交瘤細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)，需進(jìn)行傳代培養(yǎng)以得到更多數(shù)量的細(xì)胞。
（4）細(xì)胞融合技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是突破了有性雜交的局限，是遠(yuǎn)緣雜交成為可能。