Question

【題目】某學(xué)校研究性學(xué)習(xí)小組了解到泡菜中的乳酸菌除了在發(fā)酵中產(chǎn)生乳酸，還可以降解亞硝酸鹽，該學(xué)校研究性學(xué)習(xí)小組利用泡菜液進(jìn)行了相關(guān)的研究，請回答下列問題：

（1）乳酸菌和酵母菌在結(jié)構(gòu)上的主要區(qū)別是_______________。

（2）學(xué)習(xí)小組用改良的MRS固體培養(yǎng)基分離乳酸菌，該培養(yǎng)基成分如下：

蛋白陳	牛肉膏	酵母膏	葡萄糖		瓊脂	蒸餾水	其他成分略
10g	10g	10g	20g	20g	20g	1000ml

①該培養(yǎng)基因含碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣，從而在菌落周圍形成溶鈣圈，該培養(yǎng)基屬于______________（填“選擇”或“鑒別”）培養(yǎng)基。

②分離乳酸菌需配制以上培養(yǎng)基，圖①所示操作之前，應(yīng)對培養(yǎng)基進(jìn)行的正確操作是__________。

③某小組采用圖②所示接種的方法____________，接種后的平板在培養(yǎng)時的放置應(yīng)如圖________（選填“a”或“b”）所示。這樣放置的原因有_________。

A．防止水分過快蒸發(fā)，導(dǎo)致培養(yǎng)基干裂 B．防止皿蓋上的冷凝水滴落，造成培養(yǎng)基污染

C．有利于觀察計數(shù)，辨別菌落特征 D．移動培養(yǎng)皿時，不容易造成皿蓋打開而暴露培養(yǎng)基

（3）另一小組將泡菜液進(jìn)行梯度稀釋后，取0.1ml加入到50℃左右的培養(yǎng)基中搖勻，待凝固后，再在其上加蓋一層透明的固體培養(yǎng)基，在50℃左右操作的原因是________，加蓋一層透明的固體培養(yǎng)基的目的是_________。

①在恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72h后，挑取溶鈣圈較大的菌落，用平板劃線法進(jìn)行進(jìn)一步純化，下圖是接種培養(yǎng)后的菌落分布圖，對應(yīng)的平板劃線操作示意圖為_____________________。

②乳酸菌在溫度為________的冷凍箱中長期保存時，需要加入一定量的_______。

Answer 1

【答案】乳酸菌沒有以核膜為界限細(xì)胞核 鑒別 滅菌 稀釋涂布平板法 a ABCD 此時培養(yǎng)基為液態(tài)且不燙手 隔絕空氣（氧氣），確保無氧環(huán)境 丙 -20℃ 甘油

【解析】

本題結(jié)合圖表，考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識記接種微生物常用的兩種方法；識記培養(yǎng)基的種類及功能；識記保存菌種的方法等，能結(jié)合所學(xué)的知識準(zhǔn)確答題。

（1）乳酸菌屬于原核生物，酵母菌屬于真核生物，原核細(xì)胞和真核細(xì)胞在結(jié)構(gòu)上的主要區(qū)別是原核細(xì)胞無以核膜為界限細(xì)胞核。

（2）①該培養(yǎng)基因含碳酸鈣而不透明，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸能溶解培養(yǎng)基中的碳酸鈣，從而在菌落周圍形成溶鈣圈，該培養(yǎng)基屬于鑒別培養(yǎng)基。

②分離乳酸菌需配制以上培養(yǎng)基，圖①倒平板操作之前，應(yīng)對培養(yǎng)基進(jìn)行的是高壓蒸汽滅菌。

③某小組采用圖②所示接種的方法稀釋涂布平板法，接種后的平板在培養(yǎng)時的放置應(yīng)如圖a倒置放置，原因是防止水分過快蒸發(fā)，導(dǎo)致培養(yǎng)基干裂；防止皿蓋上的冷凝水滴落，造成培養(yǎng)基污染；有利于觀察計數(shù)，辨別菌落特征；移動培養(yǎng)皿時，不容易造成皿蓋打開而暴露培養(yǎng)基等，故選ABCD。

（3）小組成員將泡菜液進(jìn)行梯度稀釋后，取0.1ml加入到50℃左右的培養(yǎng)基中搖勻，待凝固后，再在其上加蓋一層固體培養(yǎng)基。在50℃左右操作的原因是此時培養(yǎng)基為液態(tài)且不燙手，加蓋一層固體培養(yǎng)基的目的是隔絕空氣（氧氣），確保無氧環(huán)境。

①使用平板劃線法時，在進(jìn)行第二次以及其后的劃線操作時要從上一次劃線的末端開始劃線，如圖丙所示。

②長期保存菌種應(yīng)該用甘油管藏法，因此乳酸菌在-20℃的冷凍箱中長期保存時，需要加入一定量的甘油。