Question

【題目】某紡織廠為使牛仔布呈現(xiàn)“穿舊”效果，準(zhǔn)備用纖維素分解菌處理代替?zhèn)鹘y(tǒng)的浮石擦洗。工作人員擬從土壤樣品中分離該類微生物，并進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)，相關(guān)工藝流程如圖。請(qǐng)回答下列問題：

（1）進(jìn)行土樣中細(xì)菌數(shù)量的測(cè)定，常用稀釋涂布平板法（選用104～106倍的稀釋液）統(tǒng)計(jì)樣品中活菌的數(shù)量。但第一次用稀釋涂布平板法測(cè)定土樣中纖維素分解菌的數(shù)量時(shí)，所進(jìn)行實(shí)驗(yàn)的一般基本思路是______。

（2）在系列稀釋操作前，“選擇培養(yǎng)”的一般目的是______。

（3）“涂布接種”時(shí)，轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿的目的是______。

（4）在鑒別培養(yǎng)基上，菌落周圍的透明圈大小可能與纖維素酶的______有關(guān)。在分離出所需的菌株之后，還應(yīng)通過______的實(shí)驗(yàn)來進(jìn)一步確定分離出的菌株是纖維素分解菌，而后開展擴(kuò)大培養(yǎng)。

（5）纖維素酶的測(cè)定方法一般是______。

Answer 1

【答案】將稀釋范圍適當(dāng)放寬的稀釋液，采用稀釋涂布平板法分別接種的鑒別培養(yǎng)基（用CR染色），以保證從中選擇出菌落數(shù)在30-300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù) 以確保能夠從樣品中分離得到所需要的微生物，增加纖維素分解菌的數(shù)量 使菌液分布均勻 量和活性 發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶 對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量測(cè)定

【解析】

據(jù)圖分析可知，采用稀釋涂布分離法對(duì)纖維素分解菌進(jìn)行分離和培養(yǎng)；纖維素分解菌的鑒別可以使用剛果紅染液，在纖維素分解菌的菌落周圍會(huì)出現(xiàn)透明圈，而培養(yǎng)基的其他地方呈紅色。

（1）第一次用稀釋涂布平板法測(cè)定土樣中纖維素分解菌的數(shù)量時(shí)，需要將稀釋范圍適當(dāng)放寬的稀釋液，采用稀釋涂布平板法分別接種的鑒別培養(yǎng)基（用CR染色），以保證從中選擇出菌落數(shù)在30-300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。

（2）選擇培養(yǎng)的目的是確保能夠從樣品中分離得到所需要的纖維素分解菌，增加纖維素分解菌的數(shù)量。

（3）“涂布接種”時(shí)，轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿的目的是使菌液分布均勻。

（4）該實(shí)驗(yàn)中的透明圈的大小與纖維素酶的量和活性有關(guān)。在分離出所需的菌株之后，還應(yīng)通過發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶實(shí)驗(yàn)來進(jìn)一步確定分離出的菌株是纖維素分解菌，而后開展擴(kuò)大培養(yǎng)。

（5）纖維素酶的測(cè)定方法一般是對(duì)纖維素酶分解濾紙等纖維素后產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量測(cè)定。